[发明专利]一种蛋白质纯化方法在审
申请号: | 201711444953.7 | 申请日: | 2017-12-27 |
公开(公告)号: | CN108047303A | 公开(公告)日: | 2018-05-18 |
发明(设计)人: | 葛峰;熊倩;杨明坤;张珈;洪斌;李俊峰;付帅;张书晨 | 申请(专利权)人: | 湖北普罗金科技有限公司 |
主分类号: | C07K1/36 | 分类号: | C07K1/36;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/14 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 董建林 |
地址: | 430075 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开一种蛋白质纯化方法,包括如下步骤:S1、固相萃取剂的制备:将碳纳米管分散液超声雾化、收集、干燥,得到碳纳米管固相萃取剂;S2、蛋白质富集脱盐处理:向蛋白溶液中加入固体氯化钠,搅拌溶解,上样于活化处理后的固相萃取柱,用甲醇洗脱,收集洗脱液;S3、将上述洗脱液进行微孔过滤,进行离子交换层析,收集洗脱液100%时UV280下的吸收峰产物,并进行冻干浓缩;S4、将冻干的离子交换层析产物重溶,然后用蛋白质纯化系统进行疏水层析,收取缓冲液百分比为20%时UV280吸收峰产物。该固相萃取剂制备工艺简单、成本低,比表面积大,能够方便、快捷的实现对目的蛋白的富集、脱盐处理,为蛋白质的纯化提供了一种经济快速的新方法,应用潜力巨大。 | ||
搜索关键词: | 一种 蛋白质 纯化 方法 | ||
【主权项】:
1.一种蛋白质纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、一种新型固相萃取剂的制备方法,具体步骤为:将碳纳米管分散液超声雾化,在N2 驱动下通过高温管式炉,收集,干燥,得到碳纳米管固相萃取剂;S2、蛋白质富集脱盐处理向蛋白溶液中加入固体氯化钠,磁力搅拌下充分溶解,上样于活化处理后的固相萃取柱,乙醇溶液淋洗,真空泵抽至尽干后用甲醇洗脱,收集洗脱液;S3、离子交换层析将上述洗脱液进行微孔过滤,进行离子交换层析,收集洗脱液100%时UV280下的吸收峰产物,并进行冻干浓缩;S4、疏水层析将冻干的离子交换层析产物重溶,然后用蛋白质纯化系统进行疏水层析,收取缓冲液百分比为20%时的UV280吸收峰产物。
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