[发明专利]一种PPARs对巨噬细胞极化影响的研究方法在审
申请号: | 201711455786.6 | 申请日: | 2017-12-28 |
公开(公告)号: | CN108085380A | 公开(公告)日: | 2018-05-29 |
发明(设计)人: | 陈雪玲;吴向未;陈聪哲 | 申请(专利权)人: | 陈雪玲 |
主分类号: | C12Q1/6876 | 分类号: | C12Q1/6876;G01N33/68;A61K49/00 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 832000 新疆维吾尔自治*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | 本发明公开了一种PPARs对巨噬细胞极化影响的研究方法,该方法通过建立细粒棘球蚴感染小鼠模型以及体外原头蚴与巨噬细胞共培养体系,检测巨噬细胞PPARs的表达水平及其对巨噬细胞极化的调节,并在此基础上抑制PPARs通路,进一步探讨PPARs对巨噬细胞极化的影响,及在包虫病免疫逃逸过程中的作用。 | ||
搜索关键词: | 巨噬细胞 极化 感染小鼠模型 细粒棘球蚴 表达水平 培养体系 包虫病 体外 研究 检测 | ||
【主权项】:
1.一种PPARs对巨噬细胞极化影响的研究方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1.体外实验1.1RAW264.7细胞与原头蚴共培养,检测PPARs表达水平及对巨噬细胞极化的调节用RAW264.7细胞与原头蚴共培养,在12、24、36、48、72h分别收取细胞和上清,用qRT-PCR的方法检测PPAR-γ、PPAR-α以及巨噬细胞M1型相关因子TNF-α、MCP-1、IL-1β,M2型巨噬细胞相关因子Arg-1、TGF-β、Fizz-1的mRNA水平;ELISA方法检测MR和Arg-1的蛋白表达水平;1.2小鼠腹腔巨噬细胞与原头蚴共培养,检测PPARs表达水平及对巨噬细胞极化的调节;1.3小鼠腹腔巨噬细胞与原头蚴共培养,阻断PPARs通路,检测PPARs表达水平及对巨噬细胞极化的调节实验组提前用PPARγ/α抑制剂处理腹腔巨噬细胞2小时,对照组加等量PBS,然后再与原头蚴共培养,48h收取细胞,重复上述实验;步骤2.体内试验2.1建立原头蚴感染小鼠动物模型,检测PPARs表达水平和对巨噬细胞极化的调节;2.2建立原头蚴感染小鼠动物模型,阻断PPARs通路检测其对巨噬细胞极化的调节在建立动物感染模型前实验组用PPARγ/α抑制剂处理小鼠,对照组用等量PBS处理,24h后再建模,15天时处死小鼠收集细胞,重复上述实验。
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