[发明专利]一种高效的外泌体分离方法在审
| 申请号： | 201711460799.2 | 申请日： | 2017-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN108085338A | 公开（公告）日： | 2018-05-29 |
| 发明（设计）人： | 陈意雄 | 申请（专利权）人： | 上海恒圆生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/62;C12N5/10 |
| 代理公司： | 常州市权航专利代理有限公司 32280 | 代理人： | 刘娟 |
| 地址： | 201100 上海市闵行区元江路5*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种高效的外泌体分离方法，所述分离方法至少包括以下步骤：（1）向目标细胞中导入带有标签的CD63，培养；（2）离心后取上清液；（3）向上清液中加入磁性体，所述磁性体上含有能够与CD63上的标签特异性结合的标记物，孵育；（4）将上清液置于磁场中；（5）去除上清液后加入缓冲液，加入分选柱，利用缓冲液洗脱分选柱上滞留的外泌体，并收集。采用本发明所述的收集方法，收集效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 磁性体 分选柱 缓冲液 上清液 标签 特异性结合 目标细胞 取上清液 收集效率 标记物 滞留的 孵育 清液 洗脱 去除 磁场 | ||
【主权项】：
1.一种高效的外泌体分离方法，其特征在于，所述分离方法至少包括以下步骤：(1)通过载体向目标细胞中导入带有标签的CD63，导入成功后培养12～36h，然后筛选出含有CD63的阳性克隆细胞，再继续培养阳性克隆细胞；(2)离心前清洗细胞；对阳性克隆细胞进行离心，所述离心的条件为1000g离心5min，随后4℃12000g；离心30min离心后取上清液，并向离心后的上清液中加入缓冲液；(3)向上清液中加入磁性体，所述磁性体上含有能够与CD63上的标签特异性结合的标记物，孵育；(4)将上清液置于磁场中；(5)去除上清液后加入缓冲液，加入分选柱，利用缓冲液洗脱分选柱上滞留的外泌体，并收集。
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