[发明专利]水溶液中微量透明质酸的泡沫分离方法

摘要

水溶液中微量透明质酸的泡沫分离方法，涉及泡沫分离。以天然表面活性剂椰子油皂苷作为起泡剂和捕集剂，确定泡沫分离采收HA的工艺条件；单因素实验步骤；正交试验步骤；溶液HA分离效果评价指标；溶液中HA的浓度的测定。以天然表面活性剂椰子油皂苷(CAPB)作为起泡剂和捕集剂，通过单因素和正交实验，确定了泡沫分离采收HA的最佳工艺条件：常温下，透明质酸溶液pH为7、分离气速为350mL/min、加液量为200mL、收集时间为10min、椰子油起泡剂浓度为0.035g/L、透明质酸初始浓度为50mg/L。此时，HA富集比E＝6.821，回收率R＝66.425％。

主权项

1.水溶液中微量透明质酸的泡沫分离方法，其特征在于包括以下步骤：1)以天然表面活性剂椰子油皂苷作为起泡剂和捕集剂，确定泡沫分离采收HA的工艺条件；2)单因素实验步骤，具体步骤如下：(1)检查实验装置，确定无漏水、漏气的现象；(2)配制待分离的HA溶液：配制不同浓度的HA溶液，加入表面活性剂，用6mol/L和1mol/L NaOH溶液、6mol/L和1mol/L HCl溶液调节溶液pH值；(3)在泡沫分离装置的泡沫发生管中加入HA溶液，打开气路阀门，调节压力表和气路流量计，气泡由顶端流出，收集到烧杯中，残液由排液口排出到收集瓶中；(4)收集结束后的样品封口，静置消泡，测量泡沫液体积及残液中的HA的浓度；(5)根据所得数据计算回收率R与富集比E的值并作图；(6)清洗分离柱，先用自来水充分洗净，再用蒸馏水冲洗数次、干燥；3)正交试验步骤，具体方法如下：在单因素试验的基础上，设计并进行正交试验，对实验结果进行直观和显著性分析，确定各因素对HA回收的影响程度，确定最佳工艺条件，进行验证试验，得到最佳收集率和富集比；所述正交试验的因素包括溶液pH值、空气流速mL/min、加液量mL、溶液CAPB浓度g/L；4)分析方法如下：(1)溶液HA分离效果评价指标HA的提取效果采用富集比、收集率为评价指标，如下公式1、公式2所示；收集率：R(％)＝C_fV_f/C₀V₀×100％  (公式1)富集比：E＝C_f/C₀      (公式2)其中，C₀、C_f为原料液、提取泡沫液中透明质酸的浓度；V_f、V₀分别为原料液、提取泡沫液的体积；(2)溶液中HA的浓度的测定试验采用改良CTAB浊度法测定溶液中的透明质酸的浓度，具体步骤如下：a.配制浓度为2.5g/L的CTAB溶液：称取0.25g固态CTAB溶解于100mL0.5mol/L氢氧化钠溶液，每次使用时现配现用；b.配制乙酸缓冲液：准确称取1.640g醋酸钠固体和0.8766g氯化钠固体，加蒸馏水溶解，转移至100mL容量瓶中，定容，配制成0.2mol/L醋酸钠，0.15mol/L氯化钠溶液，用乙酸调节pH至6.0；c.绘制标准曲线：配制HA初始浓度为0‑400mg/L的标准溶液，移液枪移取300μLHA溶液、700μL乙酸缓冲液和2mL 2.5g/L CTAB溶液；于室温下混合5min，用紫外分光光度计测其在400nm下的OD值；以HA终浓度为横坐标，OD₄₀₀nm为纵坐标绘制标准曲线，改良CTAB法的拟合曲线为y＝73.73x‑0.4171，线性相关系数达到R²＝0.99299。