[发明专利]样品多重循环和原位成像的方法

摘要

本发明涉及一种通过多重循环对样品进行原位成像的方法，该方法能够以快速、高灵敏和可靠的方式通过同一样品上的多分子读数对各种分子靶标进行成像。本发明还涉及防止样品和成像试剂降解的成像缓冲液，其特别适用于本发明通过多重循环对样品进行原位成像的方法。

主权项

1.一种通过多重循环对样品进行原位成像的方法，其特征在于，包括以下步骤：(i)提供固定在样品支架上的样品；(ii)提供微流体装置，其包括微流体室，将在所述微流体室的一端的至少一个流体入口和所述微流体室的另一端的至少一个流体出口配置成在压力下通过微流体室传导从给液系统供应的流体，用于以均匀的方式在所述微流体室内平流输送流体物质和试剂，其中所述微流体室的至少一个壁由样品支架形成，并且其中微流体室的体积为约2.5μl和200μl；(iii)将所述样品支架安装在所述微流体室上，样品面向微流体室的内部；(iv)依次注入多种试剂，包括至少一个成像探针，通过流体入口进入微流体室，流速范围为约1μl/s至约100μl/s；(v)对由与所述至少一个成像探针反应的样品的组分发射的信号成像；(vi)用不同的成像探针重复步骤(iv)和(v)；其中所述依次注入多种试剂包括：‑洗脱步骤，在该步骤中注入洗脱缓冲液以除去可能残留在样品上的不需要的物质；‑非特异性结合阻断步骤，在该步骤中注入封闭液；‑样品标记步骤，在该步骤中注入成像探针；和‑任选的预成像步骤，在该步骤中注入成像缓冲液，其中这些步骤中的每一步可以在任选的洗涤步骤之前和/或之后，注入洗涤缓冲液，其中所述至少一种成像探针是由注入特异性抗体序列作为标记探针和色原或荧光检测分子产生的，靶向在所述样品内待分析的分子实体。