[发明专利]氨基酸定量方法和氨基酸定量用试剂盒有效
申请号: | 201780021302.9 | 申请日: | 2017-03-28 |
公开(公告)号: | CN109073590B | 公开(公告)日: | 2021-10-29 |
发明(设计)人: | 中柄朋子;青木秀之;喜田干子;山田健太;金子昌二;钉宫章光 | 申请(专利权)人: | 池田食研株式会社;公立大学法人广岛市立大学 |
主分类号: | G01N27/416 | 分类号: | G01N27/416;G01N33/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 张桂霞;黄希贵 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明提供使用氨酰tRNA合成酶(AARS)选择性且简便、高灵敏度地定量测定对象的氨基酸(L型和/或D型氨基酸)的方法和氨基酸定量用试剂盒。上述氨基酸定量方法,其特征在于:在使用AARS定量样品中的氨基酸量(L型和/或D型氨基酸)的方法中,通过使AARS和氨基酸从一度形成的氨酰AMP‑AARS复合体中游离、并将它们再次用于氨酰AMP‑AARS复合体的形成,最终产生达到比样品中所含的氨基酸多的摩尔数的作为测定对象的焦磷酸等反应产物;以及用于实施该方法的氨基酸定量用试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 氨基酸 定量 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.样品中的氨基酸定量方法,包括步骤(I)以及步骤(II),其中所述步骤(I)包括以下各步骤:步骤I‑1,该步骤包括下述反应1:在二价离子或者多元胺的存在下,使样品中的L型和/或D型氨基酸(L‑AA和/或D‑AA)、该氨基酸所对应的氨酰tRNA合成酶(AARS)和腺苷三磷酸(ATP)反应,形成包含氨酰腺苷酸(氨酰AMP)和AARS的复合体(氨酰AMP‑AARS复合体);步骤I‑2,该步骤包括下述反应2:使反应1和/或反应3中形成的氨酰AMP‑AARS复合体与核苷酸反应,使AARS和氨基酸(L‑AA和/或D‑AA)从该复合体中游离;步骤I‑3,该步骤包括下述反应3:通过将反应2中游离的氨基酸(L‑AA和/或D‑AA)和/或AARS在反应1中进行再利用,形成氨酰AMP‑AARS复合体反应;以及步骤I‑4,重复步骤I‑2和步骤I‑3的步骤;所述步骤(II)包括:测定步骤(I)中产生的反应产物的量,根据该反应产物的测定量确定L型和/或D型氨基酸的量。
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