[发明专利]等位基因编辑及其应用有效
| 申请号： | 201780037736.8 | 申请日： | 2017-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN109715803B | 公开（公告）日： | 2023-07-07 |
| 发明（设计）人： | M·科内特;L·杰克 | 申请（专利权）人： | 巴塞尔大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/90;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人： | 孟凡宏;王月 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明涉及在真核细胞内测定同源定向修复(HDR)事件的方法，其中所述细胞表达表面蛋白的第一同种型，其与所述表面蛋白的第二同种型在氨基酸标志物方面不同。该方法包括以下步骤：诱导DNA双链断裂；提供HDR模板DNA修复构建体，其包含与表面蛋白的第二同种型对应的氨基酸标志物，和随后测定所述细胞上所述表面蛋白的所述第一或第二同种型的表达，其中所述第二同种型的表达表明成功的HDR事件。本发明还涉及在真核细胞内编辑目标基因组位置的方法，和在未编辑和编辑细胞的组合物中选择性耗尽或富集编辑细胞的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 等位基因 编辑 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.测定在真核细胞内的第一基因组位置的第一同源定向修复(HDR)事件的方法，其中‑所述细胞表达第一表面蛋白的第一同种型，其与所述第一表面蛋白的第二同种型在氨基酸标志物方面不同，其中所述第一同种型包含由核酸序列A编码的氨基酸标志物A，和所述第二同种型包含由核酸序列B编码的氨基酸标志物B；‑所述第一基因组位置包含所述核酸序列A；且所述方法包括以下步骤：a.在所述第一基因组位置诱导第一DNA双链断裂；b.提供第一DNA修复构建体，其包含所述核酸序列B和第一对与所述第一基因组位置的5’和3’DNA序列同源的同源臂；c.测定所述细胞上所述第一表面蛋白的所述第一和/或所述第二同种型的表达，并任选地，基于所述表面蛋白的所述第一和/或所述第二同种型的表达纯化所述细胞；和d.测定所述第一HDR事件的发生，其中所述细胞上的所述第一表面蛋白的所述第二同种型的表达等于所述第一HDR事件的发生。
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