[发明专利]改良的用于产生岩藻糖基化寡糖的方法在审

专利信息
申请号: 201780062213.9 申请日: 2017-10-24
公开(公告)号: CN109790559A 公开(公告)日: 2019-05-21
发明(设计)人: S·詹尼温;D·瓦滕伯格;K·帕沙特 申请(专利权)人: 詹尼温生物技术有限责任公司
主分类号: C12P19/18 分类号: C12P19/18;C12N1/21;C12N9/10;C12N9/12
代理公司: 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 代理人: 孙占华;吴溪
地址: 德国莱茵*** 国省代码: 德国;DE
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摘要: 发明涉及通过使用在葡萄糖异生底物上培养的重组原核宿主细胞来产生岩藻糖基化寡糖的方法,以及涉及所述宿主细胞及其用途。所述宿主细胞经过遗传修饰,使果糖‑6‑磷酸转化酶的活性被消除或降低,并且外源转运蛋白促进了所产生的岩藻糖基化寡糖转运通过细胞膜。
搜索关键词: 岩藻糖基化寡糖 宿主细胞 细胞膜 原核宿主细胞 葡萄糖 遗传修饰 转运蛋白 磷酸 底物 果糖 外源 转运 改良 转化
【主权项】:
1.使用经遗传修饰的原核宿主细胞来产生岩藻糖基化寡糖的方法,所述方法包括以下步骤:‑提供原核宿主细胞,其已经遗传修饰使得至少(i)果糖‑6‑磷酸转化酶的活性——其在未经修饰的宿主细胞中具有正常水平——被降低或消除;(ii)在所述宿主细胞中过表达编码从头合成GDP‑岩藻糖所必需的酶的至少一种基因;(iii)在所述宿主细胞中表达编码α‑1,2‑岩藻糖基转移酶和/或α‑1,3‑岩藻糖基转移酶的外源基因;‑在包含碳源和/或能源的培养基中培养所述经遗传修饰的宿主细胞和/或使其生长,所述碳源和/或能源选自以下的至少一种:丙三醇、琥珀酸盐、苹果酸盐、丙酮酸盐、乳酸盐、乙醇、柠檬酸盐;和‑向所述培养基提供乳糖;从而产生所述岩藻糖基化寡糖,其可获自在其中培养所述宿主细胞的培养基。
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