[发明专利]液滴加标的相邻性保留的标签化DNA在审

专利信息
申请号: 201780078420.3 申请日: 2017-12-19
公开(公告)号: CN110139932A 公开(公告)日: 2019-08-16
发明(设计)人: R·雷伯弗斯基;J·阿格蕾丝蒂 申请(专利权)人: 生物辐射实验室股份有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12P19/34;C40B40/06;C40B50/18;C40B70/00
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 余颖;陈扬扬
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 提供了用于保持测序的DNA相邻性的组合物和方法。
搜索关键词: 相邻性 标签化 测序 液滴 保留
【主权项】:
1.一种确定单倍型基因组序列信息的方法,所述方法包括:提供基因组DNA的片段;将所述片段与载有衔接体的标签酶反应,所述载有衔接体的标签酶产生由片段中断裂点限定的DNA片段并在所述断裂点插入衔接体,其中所述反应处于使得所述标签酶结合所述断裂点以形成连接的DNA区段的条件下,所述连接的DNA区段为DNA区段‑第一衔接体‑标签酶‑第二衔接体‑(DNA区段‑第一衔接体‑标签酶‑第二衔接体)n‑DNA区段的形式,其中n是任何整数并且“‑”表示共价连接;将连接的DNA区段包封在分区中,所述分区包含:珠,所述珠具有正向引物寡核苷酸,所述正向引物寡核苷酸通过所述正向引物寡核苷酸的5'端与所述珠连接,所述正向引物寡核苷酸具有珠特异性条码以及对所述第一或第二衔接体具有特异性并与其互补的3'端;反向引物寡核苷酸,所述反向引物寡核苷酸具有与所述第一或第二衔接体互补的3'端,其中所述正向引物3'端和所述反向引物3'端与选自所述第一衔接体和所述第二衔接体的不同衔接体互补;从所述分区中的所述区段置换出所述标签酶;进行扩增,其中所述正向引物和所述反向引物寡核苷酸由所述DNA区段生成扩增子,从而用所述珠条码条码化分区内的扩增子;合并所述分区以形成包含所述扩增子的反应混合物;和对扩增子进行核苷酸测序。
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