[发明专利]一种单细胞甲基化测序文库的构建方法及其应用在审
申请号: | 201810006282.4 | 申请日: | 2018-01-02 |
公开(公告)号: | CN107904669A | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
发明(设计)人: | 李响;严建兵;陈露 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C12Q1/6869;C12Q1/6858 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种单细胞甲基化测序文库的构建方法及其应用。本发明将多重置换扩增技术应用于单细胞甲基化测序文库的构建,显著扩大了测序文库的丰富度和比对率。具体是,先利用优选的重亚硫酸盐转换试剂盒产生含尿嘧啶的小片段,之后用无标签的随机引物进行数轮扩增延伸,将游离的单链小片段引物降解后,利用高温将配对双链变性,再将单链小片段连接成单链长片段,利用5’末端封闭的无标签随机引物片段进行多重置换扩增,获得扩增终产物,最终对反应产物进行基于Tn5酶的文库构建。 | ||
搜索关键词: | 一种 单细胞 甲基化 序文 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种单细胞全基因组甲基化测序的文库构建方法,该方法包括如下步骤:1)单细胞转化DNA的获得;2)DNA的富集;3)富集DNA的建库。
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