[发明专利]一种鉴定橄榄油掺杂的检测方法

摘要

本发明公开了一种鉴定橄榄油掺杂的检测方法，包括以下步骤步骤一、引物设计针对NCBI库中棕榈脂肪酸合成的基因设计并筛选；步骤二、待检测橄榄油的DNA提取；步骤三、实时荧光定量PCR反应在所述待检测DNA油样中加入引物对GL1、GL2、EO1、EO2及TY2进行扩增，以在40个循环内是否读取到Ct值为标准，判断是否得到阳性扩增，据此判断橄榄油是否掺杂。本发明能够有效的从橄榄油中鉴别出掺入的其他油品。

主权项

一种鉴定橄榄油掺杂的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、引物设计：针对NCBI库中棕榈脂肪酸合成的基因设计并筛选：针对橄榄油，筛选出第一引物对GL1及第二引物对GL2,所述第一引物对GL1包括上游引物GL1F及下游引物GL1R, 所述第二引物对GL2包括上游引物GL2F及下游引物GL2R，所述GL1F、GL1R、GL2F、GL2R的核苷酸碱基序列分别如序列表SEQ NO:1至SEQ NO:4所示；针对目标检测物，筛选出第一引物对EO1及第二引物对EO2,所述第一引物对EO1及第二引物对EO2根据实际目标检测物的NCBI库中棕榈脂肪酸合成的基因设计并筛选得到；作为实时荧光定量PCR的内参，采用引物对TY2，所述引物对TY2包括上游引物TY2F及下游引物TY2R，所述TY2F及所述TY2R的核苷酸碱基序列分别如序列表SEQ NO:5及SEQ NO:6所示；步骤二、待检测橄榄油的DNA提取：采用质粒抽提试剂盒提取，得到待检测DNA油样；步骤三、实时荧光定量PCR反应：在所述待检测DNA油样中加入引物对GL1、GL2、EO1、EO2及TY2进行扩增，以在40个循环内是否读取到Ct值为标准，判断是否得到阳性扩增，据此判断橄榄油是否掺杂。