[发明专利]用于检测氯霉素的试纸条及其制备方法

摘要

本发明涉及一种用于检测氯霉素的试纸条及其制备方法，其中用于检测氯霉素的试纸条包括支撑板，支撑板上排布硝化纤维素膜，硝化纤维素膜的一端自硝化纤维素膜起自下而上排布结合垫和样品垫，硝化纤维素膜与结合垫相对的另一端上铺设吸水垫，硝化纤维素膜上划检测线和控制线，结合垫上添加纳米金‑氯霉素适配体复合物，检测线由结合了链霉亲和素的生物素修饰的互补探针A溶液制得；控制线由结合了链霉亲和素的探针B溶液划线制得；采用以上方法制得的试纸条具有较好的一致性、稳定性和敏感性。

主权项

1.一种用于检测氯霉素的试纸条，包括支撑板(1)，支撑板(1)上排布硝化纤维素膜(2)，硝化纤维素膜(2)的一端自硝化纤维素膜(2)起自下而上排布结合垫(3)和样品垫(4)，硝化纤维素膜(2)与结合垫(3)相对的另一端上铺设吸水垫(5)，硝化纤维素膜(2)上划检测线(6)和控制线(7)，其特征在于：结合垫(3)包被纳米金‑氯霉素适配体复合物，氯霉素适配体的核苷酸序列为：3'‑AGC‑AGC‑ACA‑GAG‑GTC‑AGA‑TGA‑CTG‑AGG‑GCA‑CGG‑ACA‑GGA‑GGG‑CAT‑GGA‑GAG‑ATG‑GCG‑TTT‑TTT‑TTT‑5'，其5'端采用疏基修饰；检测线(6)包被探针A复合物，探针A复合物由链霉亲和素和生物素修饰的探针A溶液混合制得，探针A的核苷酸序列为：5'‑CGC‑CAT‑CTC‑TCC‑ATG‑CCC‑TCC‑TGT‑CCG‑TGC‑CCT‑CAG‑TCA‑TCT‑GAC‑CTC‑TGT‑GCT‑GCT‑3'，其3'端用生物素修饰；控制线(7)包被探针B复合物，探针B复合物由链霉亲和素和生物素修饰的探针B溶液混合制得，探针B的序列为：3'‑AAA‑AAA‑AAA‑5'，其3'端采用生物素修饰；纳米金‑氯霉素适配体复合物按照如下方法制得：氯霉素适配体和纳米金溶液以体积比为1:5‑6的比例混合，室温孵育6.5‑8h，加入氯化钠至浓度为45‑50mmol/L；在室温下继续活化11‑12h，在6000‑7000r/min的转速下离心10‑15min，得到的浓缩物为纳米金‑氯霉素适配体复合物；纳米金的粒径为15‑35nm，纳米金采用柠檬酸三钠还原氯金酸制得，柠檬酸三钠与氯金酸以体积比为2‑2.5:1的比例混合，在300‑350r/min的转速下，温度为100‑110℃下搅拌11‑12min，制得纳米金溶液；样品垫(4)采用牛血清白蛋白做封闭处理，牛血清白蛋白溶液的浓度为1％。