[发明专利]利用CRISPR/Cas9技术构建Hutat2:Fc基因敲入单核细胞的实验方法有效
申请号: | 201810028924.0 | 申请日: | 2018-01-12 |
公开(公告)号: | CN108559730B | 公开(公告)日: | 2021-09-24 |
发明(设计)人: | 康文;王博文;孙永涛;左佳蕙;康文臻 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第四军医大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/90 |
代理公司: | 北京挺立专利事务所(普通合伙) 11265 | 代理人: | 倪钜芳 |
地址: | 710038 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用CRISPR/Cas9技术构建Hutat2:Fc基因敲入单核细胞的实验方法,其特征是:包括如下步骤:1)CRISPR/Cas9打靶质粒的构建;2)供体质粒的构建;3)分选原代单核细胞;4)电脉冲穿孔法转染单核细胞;5)敲入效率的鉴定。本发明方法具有简便易行,无需后期细胞筛选,即可获得较高的基因编辑效率,这大大增加了实验的可行性和应用前景。适用范围广等特点。 | ||
搜索关键词: | 利用 crispr cas9 技术 构建 hutat2 fc 基因 单核 细胞 实验 方法 | ||
【主权项】:
1.利用CRISPR/Cas9技术构建Hutat2:Fc基因敲入单核细胞的实验方法,其特征是:包括如下步骤:1)CRISPR/Cas9打靶质粒的构建;2)供体质粒的构建;3)分选原代单核细胞;4)电脉冲穿孔法转染单核细胞;5)敲入效率的鉴定。
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