[发明专利]一种鮟鱇鱼骨抗肿瘤十二肽的制备方法及应用在审
| 申请号： | 201810040906.4 | 申请日： | 2018-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN108359703A | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | 黄芳芳 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;A23L33/18 |
| 代理公司： | 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 | 代理人： | 翁霁明 |
| 地址： | 316022 浙江省舟*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 一种鮟鱇鱼骨抗肿瘤十二肽的制备方法及应用，它选用鮟鱇鱼骨作为原料，所述方法包括：a）碎料：用高速组织捣碎机将鮟鱇鱼骨进行捣碎处理，制成粉状和微颗粒状的鮟鱇鱼骨粉；b）酶解：选用中性蛋白酶对鮟鱇鱼骨粉进行酶解，制成鮟鱇鱼骨粉酶解液；c）超滤：将鮟鱇鱼骨粉酶解液加入超滤系统，用10KD、5KD、3KD的超滤膜进行超滤，收集>10KD、10‑5KD、5‑3KD和<3KD分子量的酶解液，进行冷冻干燥。 | ||
| 搜索关键词： | 鱼骨粉 鱼骨 酶解液 抗肿瘤 十二肽 超滤 酶解 制备 高速组织捣碎机 中性蛋白酶 捣碎 超滤系统 微颗粒状 超滤膜 碎料 应用 | ||
【主权项】：
1.一种鮟鱇鱼骨抗肿瘤十二肽的制备方法，它选用鮟鱇鱼骨作为原料，其特征在于所述的制备方法包括如下步骤：a）碎料：用高速组织捣碎机将鮟鱇鱼骨进行捣碎处理，制成粉状和微颗粒状的鮟鱇鱼骨粉；b）酶解：选用中性蛋白酶对鮟鱇鱼骨粉进行酶解，制成鮟鱇鱼骨粉酶解液；c）超滤：将鮟鱇鱼骨粉酶解液加入超滤系统，用10KD、5KD、3KD的超滤膜进行超滤，收集>10KD、10‑5KD、5‑3KD和<3KD分子量的酶解液，进行冷冻干燥，d）鮟鱇鱼酶解液过G‑25洗脱液得到5个峰，经体外抗肿瘤实验筛选，峰2和峰3具有最高的抗肿瘤活性的，收集峰2和峰3，冷冻干燥，进一步分离纯化并用高效液相纯度检测；e）经过反相高效液相色谱( RT‑HPLC)纯化及氨基酸序列检测：峰3用HPLC检测发现，该分子段只有1个洗脱峰，并进行氨基酸序列检测，其氨基酸序列为Met‑Trp‑ Ile‑Phe‑His‑Asp‑Ser‑Asp‑ Lys‑Asn‑ Cys‑ Arg；制成鮟鱇鱼骨抗肿瘤十二肽产品。
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