[发明专利]一种检测克罗诺杆菌的免疫磁珠层析试纸条及快速检测方法

摘要

本发明涉及一种检测克罗诺杆菌基因的免疫磁珠层析试纸条。试纸条的硝酸纤维膜上设有检测T线和对照C线，检测T线由100μM的长度20 bp的捕获探针、5 mg/mL链霉亲和素和50mM的磷酸盐缓冲液按体积比1∶1∶6混匀的捕获探针溶液制成；对照C线由抗牛血清白蛋白抗体溶液和磷酸缓冲液混匀的浓度1～5 mg/mL的标准溶液制成。用于检测奶粉中是否存在克罗诺杆菌时，将被测奶粉通过细菌DNA提取、聚合酶链反应、PCR产物与免疫磁珠结合制得被检测液；将被检测液滴加于免疫磁珠层析试纸条的样品垫上，室温反应10 min，即可观察结果。若检测T线和对照C线均显示黄色线条，表示被检测液为阳性；若对照C线显示黄色，表示被检测液为阴性。对实际样品的检测反应时间缩短至8‑11 h。

主权项

1.一种检测克罗诺杆菌基因的免疫磁珠层析试纸条，包括衬板，衬板上依次衔接设有的样品垫、硝酸纤维膜和吸水垫，所述硝酸纤维膜上设有隐形的检测T线和对照C线，其特征在于：所述检测T线由100 μM的长度20 bp的捕获探针、5 mg/mL链霉亲和素和50 mM的磷酸盐缓冲液按体积比1∶1∶6混匀的捕获探针溶液制成，所述捕获探针的DNA序列为：5'‑Biotin‑GGCGGAGCCGAATAACTGGG‑3'；所述对照C线由抗牛血清白蛋白抗体溶液和磷酸缓冲液混匀的浓度1～5 mg/mL的标准溶液制成。