[发明专利]螨变应原特异性卵黄免疫球蛋白抗体及其抗过敏制剂

摘要

本发明涉及一种螨变应原特异性卵黄免疫球蛋白抗体及其抗过敏制剂，螨变应原特异性卵黄免疫球蛋白抗体主要由如下方法制备而成：螨变应原提取、对鸡进行强化免疫、粗提物制备、精提、纯化。本发明的抗螨变应原特异性卵黄免疫球蛋白及其制剂的抗体活性高、对螨引起的局部致敏有特异性的防御作用，对其它致敏原引起的局部致敏有良好的隔阻效应，无免疫原性，对人体皮肤黏膜无不良反应，安全性能高。

主权项

1.一种螨变应原特异性IgY抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：螨变应原制备：选取纯化螨虫体，采用Coca’s液提取方法，制得螨变应原粗提物；免疫疫苗制备：将所述螨变应原粗提物溶解在0.1mol/L 的PBS 溶液中充分混匀，得到螨变应原溶液, 其蛋白浓度为2mg/ml；吸取1‑1.5ml螨变应原溶液，加入5.25‑6ml生理盐水混匀，得到螨混合抗原溶液Ⅰ，按1:1 的比例将弗氏完全佐剂加入螨混合抗原溶液Ⅰ中混合均匀，制得乳状螨复合抗原免疫佐剂Ⅰ，作为首免疫苗；吸取2‑3ml螨变应原溶液，加入5.25‑6ml生理盐水混匀，得到螨混合抗原溶液Ⅱ，按1:1 的比例将弗氏不完全佐剂加入螨混合抗原溶液Ⅱ中混合均匀，制得乳状螨复合抗原免疫佐剂Ⅱ，作为强化免疫疫苗；对鸡进行强化免疫：吸取所述首免疫苗剂量200μl，分别在鸡的左右翅下各两处进行皮下注入进行首次免疫，然后每隔10天使用所述强化免疫疫苗强化免疫一次，共强化免疫四次；在第三次和第四次强化免疫后分别收集经过强化免疫的鸡所产的鸡蛋，并在鸡翅下采血，采血量为1‑1.5ml，首次免疫和第一次强化免疫在产蛋前期进行；IgY抗体的提取：对收集的鸡蛋进行取蛋黄处理，1体积蛋黄加5‑6体积的双蒸水，充分搅拌混合均匀后，调试pH至5‑6，然后将其置于4℃静置8‑10小时，冷冻离心15‑30min，取上清液，获得粗提物；精提：在获得的粗提物中加入60%硫酸钠沉淀一次，再用14%硫酸钠溶液沉淀两次，取上清液进行超滤除菌、除离子获得精提物；纯化：通过纤维素对获得的精提物进行柱层析纯化，得到螨变应原特异性IgY抗体。