[发明专利]一种重组人源胶原蛋白的纯化方法有效
| 申请号： | 201810062017.8 | 申请日： | 2018-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN108070032B | 公开（公告）日： | 2021-12-21 |
| 发明（设计）人： | 邓晗;史瑾;郝东;王维;王俊;赵金礼;杨小琳 | 申请（专利权）人： | 陕西慧康生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C07K14/78 | 分类号： | C07K14/78;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18 |
| 代理公司： | 西安永生专利代理有限责任公司 61201 | 代理人： | 高雪霞 |
| 地址： | 710054 陕西省西安市雁*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组人源胶原蛋白的纯化方法，先采用固液分离技术、过滤技术以及超滤技术对大批量的重组人源胶原蛋白进行粗纯，然后用离子交换层析技术进行精纯，所得目标蛋白纯度大于98％，收率大于70％。本发明工艺过程更简单、易操作，对纯化成本要求低，可满足重组人源胶原蛋白工业化生产要求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 胶原 蛋白 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种重组人源胶原蛋白的纯化方法，其特征在于：(1)粗分离将重组人源胶原蛋白发酵液用沉降式离心机进行固液分离，所得上清液用0.2μm中空纤维膜进行过滤，滤出液用截留分子量为6K的超滤膜进行超滤；(2)精细分离纯化向步骤(1)超滤后的浓缩液中加入柠檬酸，调节浓缩液的电导率为2.1～5.8mS/cm，再用NaOH调节pH至4.5～6.0，然后通过弱阳离子交换层析柱纯化，纯化时先用流动相A洗脱，再用流动相A与流动相B体积比为95:5的混合液洗脱，最后用流动相A与流动相B体积比为90:10～70:30的混合液洗脱，洗脱流速均为150～250L/min；收集流动相A与流动相B体积比为90:10～70:30时的洗脱液，得到纯度大于98％的重组人源胶原蛋白；上述的流动相A是20～50mmol/L pH＝4.5～6.0的柠檬酸缓冲液；流动相B是含1mol/LNaCl的20～50mmol/L pH＝4.5～6.0的柠檬酸缓冲液。
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