[发明专利]一种子宫内膜干细胞的分离培养方法在审
申请号: | 201810065994.3 | 申请日: | 2018-01-24 |
公开(公告)号: | CN107988148A | 公开(公告)日: | 2018-05-04 |
发明(设计)人: | 曹毓琳;刘俊江;时兆田;白志惠 | 申请(专利权)人: | 北京臻溪谷医学研究中心(有限合伙) |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;A01N1/02 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人: | 王玉松 |
地址: | 100032 北京市西城*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种子宫内膜干细胞分离培养方法,所述方法包括以下步骤1)采集经血样本;2)子宫内膜干细胞的分离;3)子宫内膜干细胞的原代培养。该方法分离得到的子宫内膜干细胞纯度高,原代培养的细胞增殖活性高,传代培养的细胞活率高,污染率低。 | ||
搜索关键词: | 一种 子宫 内膜 干细胞 分离 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种子宫内膜干细胞的分离培养方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:1)采集经血样本;2)子宫内膜干细胞的分离:取100‑200重量份的步骤1)采集的经血样本,与20‑40重量份的浓度为0.9%的氯化钠注射液混合均匀,放置于多功能振荡器上振摇20‑30min,加入淋巴细胞分离液,离心,得到四层分离液,吸出底层分离液,即得A液,去除顶层透明液体,再加入1‑2重量份的HES和1.5‑2.5重量份的消化酶混合均匀,将混合液倒入离心管中,将离心管放置于离心机中离心6‑8min,弃上清,取沉淀,即得B液,将A液和B液用同体积的PBS缓冲液洗涤,过200μm细胞筛网,收集子宫内膜干细胞;3)子宫内膜干细胞的原代培养:将步骤2)分离得到的子宫内膜干细胞进行原代培养,得原代培养细胞。
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