[发明专利]一种新型酿酒酵母表达体系及其构建方法有效
| 申请号： | 201810068015.X | 申请日： | 2018-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN108410902B | 公开（公告）日： | 2021-05-18 |
| 发明（设计）人： | 鲍晓明;徐丽丽;邱晨曦;李洪兴;易勇;张继祥;付传超;王栋 | 申请（专利权）人： | 齐鲁工业大学;山东圣琪生物有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/65;C12R1/865 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 耿媛媛 |
| 地址： | 250353 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明利用RNA聚合酶I在rDNA基因转录方面的高效作用，用rDNA基因启动子启动外源或内源基因表达，构建了一种新型酿酒酵母表达体系。一种酿酒酵母新型表达体系及其构建方法，包括一种新型表达载体，所述载体从5’到3’依次包括YEplac195质粒骨架、外源基因表达盒、筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括rDNA启动子、内部核糖体进入位点（Internal ribosome entry site，IRES）序列、外源基因表达框、poly(T)序列、rDNA终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、筛选标记基因、转录终止子。本发明的表达系统可实现外源基因在酿酒酵母中的高效表达，对酿酒酵母产品开发及基础理论研究具有重要的意义，同时对于酿酒酵母中RNA聚合酶I介导的调控机制和rRNA合成机制的研究也具有重要的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 酿酒 酵母 表达 体系 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种新型酿酒酵母表达体系，由表达载体转染宿主构成，其特征在于，所述表达载体为环状，是构建于酿酒酵母和大肠杆菌间的穿梭质粒载体，该载体从5’到3’ 依次包括以下可操作性元件：YEplac195质粒骨架、外源或内源基因表达盒、筛选标记基因表达盒；所述YEplac195质粒是酵母附加体质粒，含有酵母2μ质粒的ori；所述外源或内源基因表达盒自上游至下游依次包括rDNA启动子、内部核糖体进入位点序列、外源或内源基因表达框、poly(T)序列、rDNA终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、筛选标记基因、转录终止子。
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