[发明专利]利用双三元泵在线检测血液中卡马西平药物含量的方法

摘要

本发明的发明名称为利用双三元泵在线检测血液中卡马西平药物含量的方法，它是使用高效液相色谱分析仪和DAD检测器对标准溶液进行标定，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，取待测血液样品，在该待检测血液经过处理后，同样使用高效液相色谱分析仪和DAD检测器对待测的样品进行检测，得到待测血液y值，将待测血液y代入标准曲线方程中，通过计算得到待检测血液中的卡马西平药物浓度，该方法准确、快速、特异性强，具有较高的分离度和灵敏度，为临床上卡马西平的血药浓度监测提供了可靠的实验数据，更便于医生为患者及时提供准确的卡马西平给药方案。

主权项

1.一种利用双三元泵在线检测血液中卡马西平药物含量的方法，其特征在于：它包括以下步骤：(一)标准溶液的标定首先将至少三种不同浓度的标准工作液10μL和90μL的由1∶1的甲醇和水组成的稀释液分别置于1.5mL离心管中混合制成至少三种标准溶液，上述标准溶液分别在转速为800-1200rpm下涡旋混匀1-2min后，用高效液相色谱分析仪和DAD检测器对上述至少三种标准溶液进行检测，得出上述至少三种标准溶液的卡马西平色谱图，以上述至少三个标准溶液的卡马西平峰面积作为标准曲线图的纵坐标y，以上述标准工作液中含有卡马西平的浓度作为标准曲线图的横坐标x，将以上检测所得至少三组数据进行线性回归，拟合得到标准曲线方程为y＝a*x+b，并且得出权重系数a和b；所述标准工作液为含有卡马西平的溶液；(a)标准工作液的配制：精确称取卡马西平标准品15mg置于10mL容量瓶，用甲醇进行溶解，并定容于10mL，得到标准储备液，将标准储备液用含水量为20％-60％的甲醇溶液的稀释液进行稀释，分别在含有5-400mg/L卡马西平的范围内配置出各标准工作液，并在-80℃条件下保存；(二)检测血液的离心取待检测血液至少5mL，在离心速度为3500rpm下离心10min，取上清液得血清或血浆，上述血清或血浆置于-20℃冷冻下保存至分析前备用；(三)待测样品处理(b)用一次性无菌注射器吸取步骤(二)中的血清或血浆350μL，然后将上述无菌注射器前端连接针孔滤膜，将上述血清或血浆进行过滤后，将其移入1.5mL管中，得到待测样品；(四)待测样品的检测使用高效液相色谱分析仪和DAD检测器对上述步骤(b)待测样品100μL进行检测，得出上述待测样品的卡马西平色谱图，将上述色谱图中的卡马西平峰面积y代入上述步骤(一)的标准曲线方程中，通过计算得到待检测样品中目标物浓度x，即为待检测血液中的卡马西平药物浓度；高效液相色谱分析仪包括：双三元泵、在线过滤器、SPE柱和色谱柱；标准工作液和待测样品分别通过双三元泵依次进入在线过滤器、SPE柱和色谱柱。