[发明专利]一种低分子量羊栖菜多糖的制备方法

摘要

本发明提供了一种低分子量羊栖菜多糖的制备方法，是将羊栖菜洗净、粉碎、过筛、回流脱脂、冷水浸提、醇沉、冷冻干燥、D101型大孔树脂脱色，再用三氟乙酸(TFA)水解即可获得分子量均一，纯度较高的低分子量羊栖菜多糖；本发明的反应条件温和，获取的低分子量多糖回收率较高；降解试剂容易从反应液中直接清除，产物分离纯化方便，并且操作简单适合工业化生产。

主权项

1.一种低分子量羊栖菜多糖的制备方法，详细步骤如下：(1)将洗净烘干的羊栖菜粉碎，过40目药筛；(2)将步骤(1)中得到的羊栖菜藻粉与95％的乙醇充分混合，羊栖菜藻粉∶95％乙醇＝1∶5～15(m∶v)，80℃回流脱脂，时间3h/次，至少重复三次；(3)将步骤(2)中得到的脱脂后的羊栖菜藻粉按照料液比为1∶20(m∶v)加入蒸馏水浸提，时间8h/次，至少重复三次；(4)将步骤(3)中得到的浸提液于50℃下减压浓缩至原体积的2％，加入4mol/L氯化钙至不再产生沉淀后4500r/min离心10min；(5)将步骤(4)中得到的上清液于50℃下减压浓缩至在烧瓶内开始挂壁后缓慢加入95％乙醇至乙醇浓度为80％，醇沉过液，醇沉获得的沉淀便是羊栖菜多糖；(6)将步骤(5)醇沉后得到的沉淀，复溶于水，进行减压冷冻干燥；(7)脱色处理：利用D101型大孔树脂作为层析柱(500mL)的填料，将羊栖菜多糖配制成5％的溶液，每次上样10mL，用0.5～2mol/L的氯化钠洗脱脱色；(8)低分子量羊栖菜多糖的制备：以脱色后羊栖菜多糖为原料，将多糖用0.5mol/L三氟乙酸(TFA)溶液配制成5mg/mL的终浓度，65℃水浴反应4～6h，反应结束立刻减压清除多余的三氟乙酸，并将多糖溶液放入截留量为1kDa透析袋中，流水透析，除去杂质后，便获得低分子量羊栖菜多糖溶液。