[发明专利]一种CIK细胞快速扩增的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种CIK细胞快速扩增的方法及试剂盒，采用的技术方案是，一种CIK细胞快速扩增的试剂盒，所述试剂盒中包括活化剂、CIK细胞激活剂和CIK细胞增殖剂，所述活化剂由CD3单克隆抗体和IFN‑γ溶于PBS缓冲溶液配制而成；CIK细胞激活剂由IL‑2、IL‑1α和IFN‑γ溶于PBS缓冲溶液配制而成；CIK细胞增殖剂由IL‑2、抗坏血酸、维生素E、人血浆白蛋白和胰岛素组成。本发明具有如下优点：CIK细胞快速扩增方法及试剂盒使用方便，操作简单，能高效、快速扩增CIK细胞，大大缩短培养周期，两周时间即可将50mL～100mL外周血中分离的单个核细胞诱导扩增CIK细胞达到2～8×1010个。

主权项

1.一种CIK细胞快速扩增的方法，包括分离外周血单个核细胞的步骤，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：①活化培养瓶：向培养瓶中加入活化剂至覆盖瓶底，孵育，得活化培养瓶，所述活化剂由CD3单克隆抗体和IFN-γ溶于PBS缓冲溶液配制而成；②配制活化培养基：向49mL含血浆的基础培养基中加入1mL的CIK细胞激活剂，得活化培养基，所述CIK细胞激活剂由IL-2、IL-1α和IFN-γ溶于PBS缓冲溶液配制而成；③接种单个核细胞：以活化培养基重悬单个核细胞，接种于活化培养瓶，37℃、5％CO2培养箱中培养48-96h，得CIK细胞；④扩增CIK细胞：弃活化培养基，加入扩增培养基，37℃、5％CO2培养箱中培养至所需数量，所述扩增培养基为含有IL-2、抗坏血酸、维生素E、人血浆白蛋白和胰岛素的基础培养基。