[发明专利]一种高效的基因工程载体

摘要

本发明提供5’到3’分别为T‑F‑GOI；T‑GOI‑F；F‑T‑GOI；F‑GOI‑T；GOI‑T‑F；GOI‑F‑T；F‑GOI；GOI‑F；或P‑F‑GOI；P‑GOI‑F；F‑P‑GOI；F‑GOI‑P；GOI‑P‑F；GOI‑F‑P；F‑GOI；GOI‑F所示核苷酸构建物，各元件如说明书所述。利用该核苷酸构建物可将大量外源基因整合在基因组中，但不破坏整合位点附近的基因功能，不影响宿主细胞的生存。

主权项

1.一种核苷酸构建物，所述核苷酸构建物具有以下所示的I类结构：5’H‑T‑F‑GOI‑3’H；5’H‑T‑GOI‑F‑3’H；5’H‑F‑T‑GOI‑3’H；5’H‑F‑GOI‑T‑3’H；5’H‑GOI‑T‑F‑3’H；5’H‑GOI‑F‑T‑3’H；5’H‑F‑GOI‑3’H；5’H‑GOI‑F‑3’H；其中，T是外源性终止子；F为B‑C‑Marker‑B所示基因片段；其中B是位点特异性重组位点；C是所述位点特异性重组位点相对应的重组酶表达盒；Marker是标记基因表达盒；GOI是外源基因表达盒；或者，所述核苷酸构建物具有以下所示的II类结构：5’H‑F‑GOI‑P‑3’H；5’H‑GOI‑F‑P‑3’H；5’H‑P‑F‑GOI‑3’H；5’H‑P‑GOI‑F‑3’H；5’H‑F‑P‑GOI‑3’H；5’H‑GOI‑P‑F‑3’H；5’H‑F‑GOI‑3’H；5’H‑GOI‑F‑3’H；其中，P是外源性启动子；F、B、C、Marker和GOI如上所述。