[发明专利]一种用于制备细胞因子的杂交瘤T细胞株的构建在审
申请号: | 201810120349.7 | 申请日: | 2018-02-05 |
公开(公告)号: | CN108251413A | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 翁炳焕;李兰娟;洪雪娟;朱丹华;应俊 | 申请(专利权)人: | 翁炳焕 |
主分类号: | C12N15/07 | 分类号: | C12N15/07;C12N5/22 |
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地址: | 310006 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 一种用于生物医学领域细胞因子制备的杂交瘤T细胞株的构建,其特征在于以免疫磁珠法分选的CD4+T细胞和骨髓瘤细胞(SP2/0)经含有PHA、IFN‑γ、SP2/0‑IgG、CD4+T‑IgG和SPA的预融合剂处理,在PHA和IFN‑γ的活化下,IgGFc段与SPA结合而IgGFab段各自与CD4+T细胞、SP2/0细胞结合,依赖于SPA和IgG的作用,将CD4+T细胞和骨髓瘤细胞(SP2/0)连接在一起,进而在低浓度融合剂聚乙二醇(PEG1000‑2000)的作用下使两种细胞融合,经细胞融合培养基(HAT)选择培养,获得能在体外长期培养、能产生IFN‑γ、IL‑2、IL‑4细胞因子的抗HIV感染的杂交瘤CD4+T细胞株。 | ||
搜索关键词: | 杂交瘤 骨髓瘤细胞 细胞融合 细胞因子 融合剂 构建 生物医学领域 体外长期培养 制备细胞因子 免疫磁珠法 抗HIV感染 聚乙二醇 细胞结合 选择培养 培养基 分选 活化 制备 | ||
【主权项】:
1.一种用于制备细胞因子的杂交瘤T细胞株的构建,其特征在于,CD4+T细胞和骨髓瘤细胞经含有PHA、IFN‑γ、SP2/0‑IgG、CD4+T‑IgG和SPA的预融合剂处理,IgGFc段与SPA结合而IgGFab段分别与CD4+T细胞、SP2/0细胞结合,形成的结合物拉近了被融合细胞的距离,易于在聚乙二醇的作用下发生融合,获得能在体外长期培养并能产生IFN‑γ、IL‑2、IL‑4细胞因子的杂交瘤CD4+T细胞株。
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