[发明专利]纤维素酶高产菌株的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 201810130338.7 | 申请日： | 2018-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN108485984A | 公开（公告）日： | 2018-09-04 |
| 发明（设计）人： | 赫荣琳;涂然;张东远 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N3/00;C12Q1/34;C12R1/885 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 史霞 |
| 地址： | 300308 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种纤维素酶高产菌株的高通量筛选方法，包括：步骤一、将纤维素酶产生菌的孢子置于湿室培养，直至孢子萌动至接近萌发的状态结束湿室培养；步骤二、采用液滴微流控技术将孢子、培养基以及纤维素酶标记底物包埋于液滴中，进行预培养，在孢子萌发产生的菌丝长度达到液滴边缘之前结束预培养；步骤三、检测液滴内的荧光，根据液滴内的荧光强度进行液滴微流控分选，筛选出荧光强度相对较高的一个或几个液滴；步骤四、对分选后的液滴中的孢子进行纯培养及复筛，以筛选出纤维素酶高产菌株。本发明筛选通量可以达到104个突变体/天。采用本发明的高通量筛选方法，得到了若干株酶活提高的突变体，其中最高突变株纤维素酶活提高达42％。 | ||
| 搜索关键词： | 液滴 孢子 纤维素酶高产菌株 高通量筛选 荧光 突变体 微流控 预培养 筛选 分选 湿室 纤维素酶产生菌 纤维素酶活 菌丝 标记底物 纤维素酶 液滴边缘 状态结束 孢子萌发 培养基 纯培养 检测液 突变株 包埋 复筛 酶活 通量 | ||
【主权项】：
1.纤维素酶高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括：步骤一、将纤维素酶产生菌的孢子置于湿室培养，直至孢子萌动至接近萌发的状态结束湿室培养；步骤二、采用液滴微流控技术将所述步骤一培养的孢子、培养基以及纤维素酶标记底物包埋于液滴中，进行预培养，在孢子萌发产生的菌丝长度达到液滴边缘之前结束预培养；步骤三、检测液滴内的荧光，根据液滴内的荧光强度进行液滴微流控分选，筛选出荧光强度相对较高的一个或几个液滴；步骤四、对分选后的液滴中的孢子进行纯培养及复筛，以筛选出纤维素酶高产菌株。
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