[发明专利]一种用于病毒包装的293T细胞株的构建方法在审
| 申请号： | 201810131733.7 | 申请日： | 2018-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN108456696A | 公开（公告）日： | 2018-08-28 |
| 发明（设计）人： | 刘骏;周春艳;金丽;肖倩;谢伟建;刘清波 | 申请（专利权）人： | 复百澳（苏州）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867 |
| 代理公司： | 苏州周智专利代理事务所(特殊普通合伙) 32312 | 代理人： | 周雅卿 |
| 地址： | 215024 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于病毒包装的293T细胞株的构建方法，包括如下步骤：步骤一：合成靶向EIF2AK2基因的sgRNA克隆质粒；步骤二：EIF2AK2‑sgRNA‑CAS9质粒转染293T细胞；步骤三：通过嘌呤霉素筛选获得EIF2AK2基因敲除的单克隆细胞株；步骤四：病毒包装。本发明通过该方法获得的293T细胞(EIF2AK2‑KO)，在转染相同量的病毒包装质粒时，生产的病毒量要高于未做处理的293T细胞(EIF2AK2‑CON)。即，在293T细胞中通过去除EIF2AK2基因的表达，能够提高病毒的生产量，降低病毒的生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒包装 细胞 细胞株 构建 病毒 单克隆细胞株 基因敲除 克隆质粒 质粒转染 嘌呤霉素 基因 病毒量 靶向 质粒 转染 去除 生产成本 合成 筛选 生产 | ||
【主权项】：
1.一种用于病毒包装的293T细胞株的构建方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤一：合成靶向EIF2AK2基因的sgRNA克隆质粒；步骤二：EIF2AK2‑sgRNA‑Cas9质粒转染293T细胞；步骤三：通过嘌呤霉素筛选获得EIF2AK2基因敲除的单克隆细胞株；步骤四：病毒包装。
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