[发明专利]坦布苏病毒非结构蛋白NS2A截短蛋白的表达方法及其产品和应用在审
| 申请号： | 201810132812.X | 申请日： | 2018-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN108484736A | 公开（公告）日： | 2018-09-04 |
| 发明（设计）人： | 陈舜;姜博文;张伟;程安春;汪铭书 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/18 | 分类号： | C07K14/18;C12N15/70;C07K16/10;G01N33/569 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人： | 胡琳梅 |
| 地址： | 611100 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种坦布苏病毒非结构蛋白NS2A截短蛋白的表达方法及其产品和应用，通过将非结构蛋白NS2A截短，然后进行重组表达，截短后容易表达，且表达量高；表达中通过优化表达条件使重组蛋白在包涵体内表达，便于纯化，纯化的蛋白具有免疫原性，免疫动物后能够获得效价高的多抗血清，并且制得的抗体灵敏度高，可用于坦布苏病毒非结构蛋白NS2A的检测以及并检测坦布苏病毒在感染不同时期非结构蛋白NS2A在细胞内的定位变化情况，对坦布苏病毒的研究具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒非结构蛋白 非结构蛋白 截短蛋白 截短 病毒 抗体灵敏度 表达条件 定位变化 多抗血清 免疫动物 免疫原性 体内表达 重要意义 重组表达 重组蛋白 表达量 检测 可用 效价 应用 蛋白 细胞 感染 优化 研究 | ||
【主权项】：
1.坦布苏病毒非结构蛋白NS2A截短蛋白的表达方法，其特征在于，具体步骤如下：1)以感染坦布苏病毒的鸭胚成纤维细胞提取的RNA为模板，反转录合成cDNA，然后以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示序列为引物进行PCR扩增，扩增获得NS2A截短基因；2)将步骤1)扩增获得的NS2A截短基因连入表达载体获得重组表达载体，然后将重组表达载体转化宿主表达菌，获得工程菌，然后将工程菌用IPTG诱导表达，经纯化获得坦布苏病毒非结构蛋白NS2A截短蛋白。
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