[发明专利]一种表达兔病毒性出血症病毒Ⅱ型衣壳蛋白杆状病毒的制备及应用在审
| 申请号： | 201810135244.9 | 申请日： | 2018-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN108359645A | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | 刘光清;缪秋红;朱杰;唐井玉;殷冬冬;李传峰;陈宗艳 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院上海兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心上海分中心） |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/35;C12N15/866;A61K39/12;A61P31/20;G01N33/569 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 庄文莉 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种表达兔病毒性出血症病毒Ⅱ型衣壳蛋白杆状病毒的制备及应用，所述制备方法包括以下步骤：A、扩增RHDV2的VP60基因；B、将步骤A得到的VP60基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体中，得质粒；C、将步骤B得到的质粒转化感受态细胞，得重组质粒；D、将步骤C得到的重组质粒在脂质体介导下转染昆虫细胞，即得所述表达兔病毒性出血症病毒Ⅱ型衣壳蛋白杆状病毒。本发明成功构建了表达兔病毒性出血症Ⅱ型衣壳蛋白的杆状病毒，并使其在昆虫细胞上成功表达，最终通过蛋白电泳，免疫印迹、电镜观察进行了病毒表达产物的鉴定。该杆状病毒在未来可以用来进行新型兔病毒性出血症亚单位疫苗的研究，以此用来预防兔病毒性出血症Ⅱ型。 | ||
| 搜索关键词： | 杆状病毒 衣壳蛋白 兔病毒性出血症病毒 兔病毒性出血症 制备 重组质粒 昆虫杆状病毒表达 病毒表达产物 转染昆虫细胞 感受态细胞 亚单位疫苗 脂质体介导 蛋白电泳 电镜观察 昆虫细胞 免疫印迹 质粒转化 构建 扩增 质粒 应用 克隆 成功 预防 研究 | ||
【主权项】：
1.一种表达兔病毒性出血症病毒Ⅱ型衣壳蛋白杆状病毒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、扩增RHDV2的VP60基因；B、将步骤A得到的VP60基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体中，得质粒；C、将步骤B得到的质粒转化感受态细胞，得重组质粒；D、将步骤C得到的重组质粒在脂质体介导下转染昆虫细胞，即得所述表达兔病毒性出血症病毒Ⅱ型衣壳蛋白杆状病毒。
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