[发明专利]用于香榧苗期性别鉴定的特异性分子标记TGMI001

摘要

本发明公开了用于香榧苗期性别鉴定的特异性分子标记TGMI001。本分子标记TGMI001的上游引物TGMI001‑F核苷酸序列如SEQ.ID No1所示，下游引物TGMI001‑R核苷酸序列如SEQ.ID No2所示；所述标记在雄性个体中扩增所得特异性条带核苷酸序列如SEQ.ID No3所示。本特异性分子标记TGMI001可用于香榧苗期雌雄性别的早期鉴定检测，不但可以打击香榧幼苗掺假行为，减少损失，而且有助于造林时开展雌雄幼苗合理规划，避免大量雄株在生产中造成浪费；此外本特异性分子标记可用于雌雄性别标记辅助选择，提高育种效率，缩短育种周期，具有很大的应用潜力和较好的经济价值。

主权项

1.用于香榧苗期性别鉴定的特异性分子标记TGMI001，其特征在于该引物核苷酸序列如下：

上游引物TGMI001‑F：5’‑GCCCAGGCATTCTGAAACA‑3’，如SEQ.ID No1所示；

下游引物TGMI001‑R：5’‑CCCCGTCCCAAAAAACAAA‑3’，如SEQ.ID No2所示。

2.权利要求1所述的用于香榧苗期性别鉴定的特异性分子标记TGMI001在香榧苗期进行雌雄性别鉴定的应用。

3.一种利用如权利要求1所述的特异性分子标记进行香榧苗期性别鉴定的方法，其特征在于该方法首先提取待测香榧幼苗样本的基因组DNA为模板，利用如权利要求1所述的特异性分子标记TGMI001进行PCR扩增得到扩增产物；对得到的扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现一条461bp的DNA条带，则待测样本为雄性个体；若电泳结果未出现一条461bp的DNA条带，则待测样本为雌性个体。

4.如权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于PCR扩增体系(总体积10μL)：10×PCR Buffer(含Mg²⁺)1μL，10mmol/L dNTPs 0.3μL，10μmol/L上游引物0.5μL，10μmol/L下游引物0.5μL，5U/μL Taq酶0.2μL，DNA模板(20ng/μL)1μL，ddH₂O 6.5μL。

5.如权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于PCR反应程序为：94℃预变性5分钟；32个循环(94℃变性40秒，退火温度59℃复性40秒，72℃延伸90秒)；最后72℃延伸10分钟。