[发明专利]间充质干细胞的分离培养方法及冻存、复苏方法在审
申请号: | 201810155579.7 | 申请日: | 2018-02-23 |
公开(公告)号: | CN108315296A | 公开(公告)日: | 2018-07-24 |
发明(设计)人: | 杨涛;隋昳 | 申请(专利权)人: | 深圳至博生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A01N1/02 |
代理公司: | 深圳市精英专利事务所 44242 | 代理人: | 任哲夫 |
地址: | 518000 广东省深圳市龙华区观湖街道*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,提供一种间充质干细胞的分离培养方法及冻存、复苏方法。一种间充质干细胞的分离培养方法,包括:获取间充质干细胞原代细胞;间充质干细胞原代细胞的培养扩增:间充质干细胞的分离。该间充质干细胞的分离培养方法,能得到具有良好的细胞质量、安全性以及生物学效应的间质干细胞。并且针对上述间充质干细胞的分离培养方法所得到的间质干细胞,本发明还提供一种间充质干细胞的冻存、复苏方法,能很好的保存并复苏该间质干细胞。 | ||
搜索关键词: | 间充质干细胞 分离培养 充质干细胞 间质干细胞 冻存 种间 复苏 原代细胞 生物技术领域 生物学效应 扩增 细胞 保存 | ||
【主权项】:
1.一种间充质干细胞的分离培养方法,其特征在于:包括:获取间充质干细胞原代细胞;间充质干细胞原代细胞的培养扩增:间充质干细胞原代细胞培养5‑10天后换成无血清DMEM营养液,至细胞65~75%融合,移去培养上清液,然后添加第一消化液,消化0.5‑2min,细胞收缩后加入所移去的培养上清液中和后进行离心分离,重新加入完全培养基重悬,按照1传1~1.5接种,培养4~5天后,细胞65~75%融合时以1:6~8的比例进行传代培养;及间充质干细胞的分离:收集间充质干细胞原代细胞的培养扩增中的处于P2或P3对数生长期且细胞融合程度不超过80%的细胞,按传代的要求消化、中和、洗涤后即可收集得到所需的间充质干细胞。
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