[发明专利]一种缓解疲劳和抗氧化的牦牛骨蛋白肽及制备方法有效

专利信息
申请号: 201810162657.6 申请日: 2018-02-27
公开(公告)号: CN108342441B 公开(公告)日: 2019-08-23
发明(设计)人: 张恒;罗永康;刘怀高 申请(专利权)人: 国肽生物工程(常德)有限公司
主分类号: C12P21/06 分类号: C12P21/06;C07K7/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;A23L33/18;A61K38/08;A61P39/06;A61P39/00
代理公司: 北京金言诚信知识产权代理有限公司 11229 代理人: 刘宝荣
地址: 415137 湖南省常德市西*** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 发明涉及一种具有缓解疲劳和抗氧化功能的牦牛骨蛋白肽的制备方法及制备得到的蛋白肽,其主要改进点为,对牦牛骨蛋白液进行高频超声波和超高压微射流等预处理,在不添加任何酸和碱的条件下,利用多种复合蛋白酶进行分步酶解,通过膜分离、凝胶分离及反相HPLC分离技术分离得到。本发明的牦牛骨蛋白肽制备方法简单,整个加工过程中没有添加酸或碱进行pH的调整,产品保持较好的功能特性,较易实现产业化生产。
搜索关键词: 蛋白肽 牦牛骨 制备 缓解疲劳 预处理 反相HPLC分离 产业化生产 复合蛋白酶 高频超声波 抗氧化功能 产品保持 功能特性 凝胶分离 超高压 蛋白液 抗氧化 膜分离 微射流 酶解 改进
【主权项】:
1.一种具有缓解疲劳和抗氧化功能的牦牛骨蛋白肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1)将牦牛骨在高温下进行蒸煮,得到牛骨蛋白液;2)对所述牛骨蛋白液进行超声和动态超高压微射流预处理,改变牛骨蛋白液中牛骨蛋白的组织结构以提高所述蛋白对酶的敏感性,降低酶的使用量;3)用蛋白酶对预处理后的牛骨蛋白液分步两步进行酶解,得酶解后的蛋白液;4)用3000道尔顿的超滤膜对所述酶解后的蛋白液进行超滤处理,得含有蛋白肽的溶液;5)将所述含有蛋白肽的溶液通过凝胶柱进行分离,然后利用反相高效液相色谱将通过所述凝胶柱分离得到的第一个洗脱峰中物质进行分离,收集分离物,即得所述牦牛骨蛋白肽,且所述牦牛骨蛋白肽包含含量为55~62%的、氨基酸序列为Val‑Ile‑Glu‑Ala‑Val‑Val‑Gln‑Ser‑Val、Asn‑Phe‑Ile‑Lys‑Gln‑Ser、Tyr‑Leu‑Glu‑Glu‑Lys、Ala‑Gly‑Glu‑Val‑Leu的肽;所述步骤3)中,第一步酶解的过程中所使用的酶为碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶的第一复合酶;第二步酶解的过程中所使用的酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的第二复合酶;所述步骤3)中,碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶的质量比为1~2:1:1;木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的质量比为1:1~2。
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