[发明专利]一种基于PCR的循环肿瘤细胞的计数方法在审
| 申请号： | 201810168428.5 | 申请日： | 2018-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN108531585A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 王焱 | 申请（专利权）人： | 南京科维思生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 杨文晰 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市江宁区秣陵街*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一个基于聚合酶链式反应的计数血液或淋巴液样品中的循环肿瘤细胞的方法。本发明使用的细胞样品可以是经过循环肿瘤细胞富集或是不经过富集的。本发明首先将细胞样品分成许多组分，使得每个组分实际上含有不超过一个循环肿瘤细胞，从每个组分的细胞中提取RNA和DNA，并使用逆转录酶将RNA转录物逆转录为cDNA，然后用PCR方法检测每个组分中的肿瘤特异性序列的存在，并以含有肿瘤特异性序列的组分数量作为样品中循环肿瘤细胞的数量。 | ||
| 搜索关键词： | 循环肿瘤细胞 肿瘤特异性序列 细胞样品 富集 淋巴液 聚合酶链式反应 逆转录酶 提取RNA 逆转录 细胞 血液 检测 | ||
【主权项】：
1.一种基于PCR的循环肿瘤细胞的计数方法，包括以下步骤：a) 把细胞样品平均分级成众多的组分，其中超过50%的组分每个组分包含不超过一个循环肿瘤细胞；b) 从每个组分的细胞中提取核糖核酸并逆转录成cDNA, 和/或提取脱氧核糖核酸；c) 使用至少一对肿瘤细胞特异性引物用聚合酶链式反应来扩增肿瘤特异性序列；d) 检测每个组分中扩增的肿瘤特异性序列；并且e) 通过计数含有肿瘤特异性序列的组分的数量来决定样品中循环肿瘤细胞的数目。
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