[发明专利]一种T细胞受体的扩增方法在审
申请号: | 201810172655.5 | 申请日: | 2018-03-01 |
公开(公告)号: | CN110218723A | 公开(公告)日: | 2019-09-10 |
发明(设计)人: | 许嘉峰 | 申请(专利权)人: | 许嘉峰 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07K14/725 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 黄欢娣 |
地址: | 312000 浙江省绍*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种T细胞受体的扩增方法,包括如下步骤:S1,提取、分离获取人外周血单个核细胞;S2,将S1中的人外周血单个核细胞置于培养基中,加入抗原多肽和白细胞介素‑2;S3,分选,获取CD8+、IFN‑γ双阳性的单细胞;S4,将S3的双阳性单细胞进行反转录;S5,以S4的反转录产物作为模板,进行PCR扩增,获得T细胞受体的扩增产物。本发明T细胞受体的扩增方法通过在引物序列两端设计不同的限制性内切酶位点,便于进行酶切过程,起到纯化T细胞受体的作用。 | ||
搜索关键词: | 扩增 人外周血单个核细胞 双阳性 限制性内切酶位点 白细胞介素 反转录产物 抗原多肽 扩增产物 引物序列 培养基 反转录 分选 酶切 | ||
【主权项】:
1.一种T细胞受体的扩增方法,其特征在于,包括如下步骤:S1,提取、分离获取人外周血单个核细胞;S2,将S1中的人外周血单个核细胞置于培养基中,加入抗原多肽和白细胞介素‑2;S3,分选,获取CD8+、IFN‑γ双阳性的单细胞;S4,将S3的双阳性单细胞进行反转录;S5,以S4的反转录产物作为模板,进行PCR扩增,获得T细胞受体的扩增产物。
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