[发明专利]一种蛋白固定化修饰的细胞培养容器在审
| 申请号： | 201810186457.4 | 申请日： | 2018-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN108314740A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 周亚凤;王绪德;申兆兴;刘雪宾 | 申请（专利权）人： | 上海晶诺生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12M3/00;C12M1/22 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 冯振宁 |
| 地址： | 200120 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白，以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为：给蛋白加上His标签；对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理；对细胞培养容器的内壁进行AB‑NTA孵育修饰；加入NiCl2溶液使AB‑NTA与Ni偶联；加入含有His标签的蛋白，与AB‑NTA中的镍离子进行亲和，使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中，包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉，因此无需多次重新加入，也保证了所用蛋白质量的一致性，使得整个培养过程的不可控因素减小，保证细胞培养及分化的效果，同时，具有可逆性、多次利用的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞培养容器 蛋白 内壁 修饰 包被 细胞培养 培养液 硅烷化处理 蛋白固定 定向固定 多次利用 培养细胞 融合蛋白 可逆性 镍离子 孵育 构建 减小 偶联 制备 保证 分化 | ||
【主权项】：
1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白为蛋白GMCSF与蛋白IL4的融合蛋白，蛋白GMCSF的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，蛋白IL4的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示。
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