[发明专利]一种神经干细胞球玻璃化冻存/复苏方法有效
| 申请号： | 201810186589.7 | 申请日： | 2018-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN108293980B | 公开（公告）日： | 2020-10-30 |
| 发明（设计）人： | 雷云霆;张国宁;刘喆;夏龙钢 | 申请（专利权）人： | 国源生命科学集团有限公司;山东国源人类遗传资源库管理有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02;C12N5/0797 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250000 山东省济南市高新区大正路1*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种神经干细胞球玻璃化冻存及复苏的方法，将神经干细胞球贴附于细胞球收集片；然后将细胞球收集片于冻存液中孵育后液氮冷冻，然后转入冻存管中于液氮中保存；复苏时，将细胞球收集片在复苏培养基中孵育复苏，以神经干细胞完全培养基培养后传代，再按照正常方式培养、传代；所述细胞球收集片，包括贴壁面和支架；所述贴壁面为长方形；所述支架与贴壁面的短边垂直相连，呈L型；所述支架高度小于贴壁面长度。本发明提供的神经干细胞球玻璃化冻存和复苏方法，可将神经干细胞球高密度束缚于一个较小的贴壁面，达到了玻璃化冻存的前提条件，并且细胞球摊开贴壁有效减小了神经球的厚度，提高了冻存保护剂的渗透效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 神经 干细胞 玻璃 化冻 复苏 方法 | ||
【主权项】：
1.一种神经干细胞球玻璃化冻存及复苏的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）神经干细胞悬浮培养成神经干细胞球；（2）使步骤（1）的神经干细胞球贴附于细胞球收集片；（3）将步骤（2）的细胞球收集片于冻存液中孵育；（4）将步骤（3）的细胞球收集片液氮速冻，然后转入冻存管中于液氮中保存；（5）将步骤（4）中的细胞球收集片在复苏培养基中孵育复苏，以神经干细胞完全培养基培养后传代，按照正常方式培养、传代；所述细胞球收集片，包括贴壁面和支架；所述贴壁面为长方形；所述支架与贴壁面的短边垂直相连，呈L型；所述支架高度小于贴壁面长度，使所述贴壁面与水平面呈一定角度。
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