[发明专利]一种枯草芽孢杆菌表达的牛分支杆菌ESAT-6蛋白及其制备方法在审
| 申请号： | 201810189596.2 | 申请日： | 2018-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN108409843A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 李海涛;苗利光;谷晨晨;刘艳环;张斌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院特产研究所;石家庄市兽用生物制品供应站 |
| 主分类号： | C07K14/35 | 分类号： | C07K14/35;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 130112 吉林省长*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 一种枯草芽孢杆菌表达的牛分支杆菌ESAT‑6蛋白及其制备方法，属于微生物领域。针对目前牛分支杆菌ESAT‑6可溶性蛋白制备方法复杂的问题，本发明将牛分支杆菌ESAT‑6基因，插入到pNC‑HisE载体中，得到ESAT‑6‑pNC‑HisE表达载体，并将ESAT‑6‑pNC‑HisE表达载体转化入枯草芽孢杆菌中，得到含ESAT‑6‑pNC‑HisE表达载体的阳性枯草芽孢杆菌，然后将上述阳性枯草芽孢杆菌单菌落接种于LB培养基中培养后，取菌液加入TM培养基，不需诱导，33～37℃培养48～64h，将菌液离心取上清，经纯化后获得牛分支杆菌ESAT‑6蛋白。本发明可用于制备ESAT‑6可溶性蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 枯草芽孢杆菌 牛分支杆菌 制备 表达载体 可溶性蛋白 蛋白 微生物领域 菌液离心 培养基 单菌落 菌液 可用 接种 诱导 基因 转化 | ||
【主权项】：
1.一种枯草芽孢杆菌表达的牛分支杆菌ESAT‑6蛋白，其特征在于，所述ESAT‑6蛋白是通过以下方法制备得到的：将牛分支杆菌ESAT‑6基因，插入到pNC‑HisE载体中，得到ESAT‑6‑pNC‑HisE表达载体，并将ESAT‑6‑pNC‑HisE表达载体转化入枯草芽孢杆菌中，得到含ESAT‑6‑pNC‑HisE表达载体的阳性枯草芽孢杆菌，然后将上述阳性枯草芽孢杆菌单菌落经LB培养基培养后，接种到TM培养基，无需诱导，获得的菌液经纯化后得到融合表达的牛分支杆菌ESAT‑6蛋白，所述牛分支杆菌ESAT‑6基因序列如SEQ ID No.1所示。
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