[发明专利]快速检测外周血液中网织红细胞数量的方法及装置在审
申请号: | 201810193030.7 | 申请日: | 2018-03-09 |
公开(公告)号: | CN108535145A | 公开(公告)日: | 2018-09-14 |
发明(设计)人: | 齐素文;李乔亮;何旭东 | 申请(专利权)人: | 深圳市瑞图生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N15/00 | 分类号: | G01N15/00;G01N15/10 |
代理公司: | 深圳市中知专利商标代理有限公司 44101 | 代理人: | 张学群;郭爱青 |
地址: | 518000 广东省深圳市宝安区福*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开一种快速检测外周血液中网织红细胞数量的方法,包括以下步骤:1,血液样本稀释:将一定量的外周血液用生理盐水准确稀释50‑100倍,得到稀释血液样本;步骤2将步骤1得到的稀释血液样本进行荧光染色,得到染色后血液样本;3,仅包含单个细胞的油包细胞液滴生成;4,油包细胞液滴的捕获:使油包细胞液滴全部放入检测微孔,且每个检测微孔中最多只容一个油包细胞液滴;5,网织红细胞数量检测;6,根据检测板检测的网织红细胞数量,计算出单位体积外周血样本中网织红细胞的含量。同时公开了一种快速检测外周血液中网织红细胞数量的装置。 | ||
搜索关键词: | 网织红细胞 外周血液 血液样本 细胞液 稀释 油包 快速检测 微孔 检测 外周血样本 单个细胞 生理盐水 数量检测 荧光染色 检测板 染色 放入 捕获 | ||
【主权项】:
1.一种快速检测外周血液中网织红细胞数量的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1血液样本稀释:将一定量的外周血液用生理盐水准确稀释50‑100倍,得到稀释血液样本(10);步骤2将步骤1得到的稀释血液样本(10)进行荧光染色,使网织红细胞中的RNA与荧光染色液工作液(20)结合1~3分钟,得到染色后血液样本(30);步骤3仅包含单个细胞的油包细胞液滴(50)生成:将染色后血液样本(30)分散在生物相容性好的硅油(40)中,将所有红细胞包裹成仅包含单个细胞的油包细胞液滴(50),每个所述油包细胞液滴(50)的直径为200um;步骤4油包细胞液滴(50)的捕获:用微电子机械系统技术在硅片、玻璃或高分子材料基片上制作开有若干检测微孔(61)的检测板(60),所述检测微孔(61)的数量大于步骤三中油包细胞液滴(50)的数量;使将步骤3中得到的油包细胞液滴(50)全部放入检测微孔(61),且每个检测微孔(61)中最多只能容一个油包细胞液滴(50)。步骤5网织红细胞数量检测:利用荧光检测装置扫描整个检测板(60),获取每个检测微孔(61)的荧光强度值,可测到荧光强度的检测微孔(61)的数量为网织红细胞的数量;步骤6根据检测板(60)检测的网织红细胞数量,计算出单位体积外周血样本中网织红细胞的含量,即用网织红细胞的数量除以外周血液的体积。
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