[发明专利]一种高产羟基四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201810232232.8 | 申请日： | 2018-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN108441460A | 公开（公告）日： | 2018-08-24 |
| 发明（设计）人： | 谢希贤;王宁;马倩;陈宁;范晓光;刘旭峰;徐庆阳;张成林;李燕军 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/90;C12P17/12;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 天津市河*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种高产羟基四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用，所述菌株在大肠杆菌基因组上整合了由木糖启动子控制的来源于T7噬菌体的RNA聚合酶；敲除了编码高丝氨酸脱氢酶I的thrA基因；整合了来源于谷氨酸棒状杆菌的lysC基因、来源于伸长盐单胞菌Halomonas elongate的ectABC基因簇以及编码四氢嘧啶羟化酶的ectD基因，均由强启动子PT7启动，重构了羟基四氢嘧啶合成途径；在琥珀酰辅酶A合成酶sucCD位点整合了ectD基因，由强启动子PT7启动；是目前报道的发酵法生产羟基四氢嘧啶的最高水平。 | ||
| 搜索关键词： | 羟基四氢嘧啶 整合 基因工程菌 强启动子 构建 合成酶 高丝氨酸脱氢酶I 大肠杆菌基因组 谷氨酸棒状杆菌 琥珀酰辅酶A 高产 发酵法生产 木糖启动子 合成途径 四氢嘧啶 盐单胞菌 基因 基因簇 羟化酶 伸长 菌株 位点 重构 应用 | ||
【主权项】：
1.一种高产羟基四氢嘧啶的基因工程菌，命名为E.coli HECT06，是以大肠杆菌为出发菌株，在其基因组上做如下改造而得到的：在大肠杆菌基因组上整合了由木糖启动子PxylF控制的来源于T7噬菌体的RNA聚合酶T7RNAP；敲除了编码高丝氨酸脱氢酶I的thrA基因，阻止L‑天冬氨酸‑β‑半醛向分支代谢产物苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸的支路代谢；通过整合来源于谷氨酸棒状杆菌的lysC基因，由强启动子PT7启动，解除赖氨酸对四氢嘧啶合成途径中的关键酶天冬氨酸激酶Ask的反馈抑制；整合来源于伸长盐单胞菌Halomonas elongate的ectABC基因簇以及编码四氢嘧啶羟化酶的ectD基因，并由强启动子PT7启动，重构了羟基四氢嘧啶合成途径；在琥珀酰辅酶A合成酶sucCD位点整合了ectD基因，由强启动子PT7启动。
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