[发明专利]一种慢病毒CMV-CBh双启动子改造载体构建及应用在审
| 申请号： | 201810257388.1 | 申请日： | 2018-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN108441516A | 公开（公告）日： | 2018-08-24 |
| 发明（设计）人： | 杨蕊菊;孙子豪;杨兴林;潘讴东 | 申请（专利权）人： | 和元生物技术（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201321 上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种慢病毒CMV‑CBh双启动子改造载体构建及应用。所述慢病毒载体pLenti‑CMV‑3FLAG‑EGFP‑tCBh‑mCherry‑T2A‑Puro由PCR扩增得到tCBh片段替换pLenti‑CMV‑3FLAG‑EGFP‑PGK‑mCherry‑T2A‑Puro载体中PGK得到。tCBh启动子驱动表达mCherry基因和Puromycin抗性基因，可以使用Puromycin筛选出稳定过表达目的基因的细胞；mCherry基因有助于判断病毒包装效率以及感染效率，同时也有助于稳定细胞的筛选。通过转染荧光观察，证明该慢病毒双启动子载体表达系统构建成功，为进一步研究感兴趣的目的基因提供基础载体。 | ||
| 搜索关键词： | 慢病毒 目的基因 双启动子 载体构建 筛选 双启动子载体 慢病毒载体 表达系统 病毒包装 基础载体 抗性基因 片段替换 稳定细胞 荧光观察 启动子 构建 转染 应用 改造 驱动 细胞 感染 成功 研究 | ||
【主权项】：
1.一种慢病毒CMV‑CBh双启动子改造载体构建及应用，所述慢病毒载体pLenti‑CMV‑3FLAG‑EGFP‑tCBh‑mCherry‑T2A‑Puro由PCR扩增得到tCBh片段(序列如SEQ ID No. 3所示)替换pLenti‑CMV‑3FLAG‑EGFP‑PGK‑mCherry‑T2A‑Puro(序列如SEQ ID No. 4所示)载体中PGK得到。
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