[发明专利]一种兽用戈那瑞林注射剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种兽用戈那瑞林注射剂的制备方法，包括戈那瑞林的合成、纯化和注射剂的制备；戈那瑞林的合成包括十个氨基酸的依次偶联及肽树脂的裂解，戈那瑞林粗肽的纯化包括洗脱、转盐、浓缩、冻干，戈那瑞林注射剂的制备包括对注射剂瓶的洗涤干燥、对瓶塞的清洗、灭菌、干燥和配料罐的溶解、压滤、半压塞灌装、冻干、真空压塞及轧盖。本发明的优点为：能耗低，收率高，环境友好，解决了现有工艺成本高、收率低、纯度差的问题。

主权项

1.一种兽用戈那瑞林注射剂的制备方法，包括戈那瑞林的合成、纯化和注射剂的制备，其特征在于：戈那瑞林的合成步骤如下：（1‑1）第一个氨基酸的偶联取1mol Rink AM 树脂放置于室温中复温20min，替代度0.9mmol/g；将复温好的树脂加入反应柱中，用DMF洗涤两次，每次洗涤2min，加入DCM溶胀30min；加入哌啶溶液脱保护两次，按DMF、MeOH、DCM、DMF顺序洗涤，每次洗涤1.5min；在第二次脱保护的同时，取1.6mol Fmoc‑Gly‑OH、1.6mol偶联试剂B，用DMF溶解，冷却至10℃以下，加入2mol偶联试剂A活化5 min，活化后的偶联液加入反应釜中搅拌，于30℃反应1.5h，茚检；茚检合格，抽掉反应液；加入DMF和2mol 封闭试剂AC2O溶液，搅拌反应3小时；（1‑2）第二个氨基酸的偶联重复步骤（1‑1）中哌啶溶液脱保护和顺序洗涤，取同量的Fmoc‑Pro‑OH和偶联试剂进行溶解、搅拌、茚检和抽液；（1‑3）同步骤（1‑2）依次偶联第三至第十个氨基酸，分别为Fmoc‑Arg(pbf)‑OH、Fmoc‑Leu‑OH、Fmoc‑Gly‑OH、Fmoc‑Tyr(tBu)‑OH、Fmoc‑Ser(tBu)‑OH、Fmoc‑Trp(Boc)‑OH、Fmoc‑His(trt)‑OH、PGlu，得到戈那瑞林肽树脂，置于不锈钢托盘吹干；（1‑4）肽树脂的裂解裂解液（三异丙基硅烷：三氟乙酸：水：乙二硫醇）按比例配置并加入血清瓶中，冷却；将戈那瑞林肽树脂加入裂解液，磁力搅拌反应2.5h，抽滤，除渣，得滤液；将滤液加入无水乙醚中静置20min，离心洗涤，得粗肽，烘干；戈那瑞林粗肽的纯化步骤如下：戈那瑞林粗肽通过洗脱、转盐、浓缩、冻干得到纯化；戈那瑞林注射剂的制备步骤如下：对注射剂瓶洗涤、干燥，对瓶塞清洗、灭菌、干燥；取戈那瑞林、甘露醇、右旋糖酐20溶解于配料罐中30℃以下的注射用水，搅拌混匀，用净化压缩空气压滤，半压塞灌装；冻干；开液压泵，真空压塞；轧盖，目检，包装。