[发明专利]一种提高庆大霉素产量的小单孢菌培养方法

摘要

本发明属于工业微生物领域，特别涉及一种提高庆大霉素产量的小单孢菌培养方法；根据小单孢菌生长特点，对新鲜的斜面孢子进行4℃冷冻贮藏处理20‑40d后，使斜面孢子量增加35‑45％，可达到85‑95％，发芽率可达到80‑90％；并对分离纯化培养、斜面培养、种子培养、发酵培养的培养基配方以及培养时间的改进，使种子菌丝易成球且生长基本同步，发酵效价提升21.5‑47.2％，最高可达1179μg/mL；通过上述方法改进，相比传统小单孢菌培养方法能够大大增加庆大霉素的产量。

主权项

1.一种提高庆大霉素产量的小单孢菌培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将小单孢菌种接种至分离纯化培养基中，培养13d，得到直径为4‑6mm，高度为3‑4mm的小单孢菌单菌落；所述分离纯化培养基由以下配方配置而成：可溶性淀粉7.0‑8.0g/L；氯化钠0.3‑0.7g/L；磷酸二氢钾0.2‑0.4g/L；硝酸钠0.8‑1.2g/L；碳酸钙0.8‑1.2g/L；琼脂粉15‑19g/L；步骤2：将分离纯化培养得到的小单孢菌单菌落接种至斜面培养基，培养11d，得到新鲜的斜面孢子；所述斜面培养基由以下配方配置而成：可溶性淀粉7.0‑8.0g/L；氯化钠0.3‑0.7g/L；磷酸二氢钾0.2‑0.4g/L；硝酸钠0.8‑1.2g/L；碳酸钙0.8‑1.2g/L；琼脂粉15‑19g/L；步骤3：对步骤2中制得的新鲜的斜面孢子进行冷藏，所述冷藏的温度为4℃，所述冷藏的时间为20‑40d；步骤4：将经过冷藏的斜面孢子接种至种子培养基，培养40h，得到第一菌液；所述种子培养基由以下配方配置而成：玉米淀粉8.0‑12.0g/L；硝酸钠0.3‑0.7g/L；黄豆饼粉8.0‑12.0g/L；大豆蛋白胨1.0‑3.0g/L；葡萄糖0.8‑1.2g/L；碳酸钙5.0‑7.0g/L；步骤5：将经过种子培养基培养制得的第一菌液接种至发酵培养基，培养120h，得到第二菌液，所述第二菌液为提高庆大霉素产量的小单孢菌；所述发酵培养基由以下配方配置而成：玉米淀粉53.0‑57.0g/L；硝酸钠0.8‑1.2g/L；黄豆饼粉33.0‑37.0g/L；大豆蛋白胨6.3‑6.7g/L；葡萄糖0.8‑1.2g/L；碳酸钙6.3‑6.7g/L。