[发明专利]定向筛选土壤目标微生物菌群的方法有效
| 申请号： | 201810313958.4 | 申请日： | 2018-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN108611274B | 公开（公告）日： | 2021-10-12 |
| 发明（设计）人： | 刘金光;李明;项萌;冉景;朱巧红;高卫民;夏溢;焦朋朋;程寒飞;安忠义 | 申请（专利权）人： | 中冶华天南京工程技术有限公司;中冶华天工程技术有限公司;中冶华天（安徽）节能环保研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12N1/20;C12Q1/686;C12Q1/689;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京鸿元知识产权代理有限公司 11327 | 代理人： | 曹素云;李琳 |
| 地址： | 210019 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种定向筛选土壤目标微生物菌群的方法，包括以下步骤：S1样品采集；S2分离培养；S3利用目标微生物特异性引物的聚合酶链式反应法快速分筛。本发明利用特异性引物和细菌菌液直接进行PCR快速筛选未知细菌菌群中的目标菌群，整个筛选过程操作简单，省时省力，快速、直观、高效，为环境样品中目标菌群的高通量筛选提供了一种快速便捷的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 定向 筛选 土壤 目标 微生物 方法 | ||
【主权项】：
1.一种定向筛选土壤目标微生物菌群的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1采集土壤样品，制备土壤悬液：取土样，置于无菌瓶中，加入缓冲液，置于摇床上震荡，得土壤悬液；S2分离培养：将步骤S1所述土壤悬液进行梯度稀释，取稀释液涂布到含有真菌抑制剂的培养基平板上，于培养箱内培养，然后，挑取单菌落在培养基平板上进行划线纯化，接着，挑取纯化后的所述单菌落，在含有无菌水的PCR管中搅拌，同时接种至含有液体培养基的离心管，再将离心管置于摇床上培养8h～12h生成菌株，PCR即聚合酶链式反应；S3快速分筛：将步骤S2所述PCR管进行PCR反应；其中，所述PCR管中溶液作为后续PCR反应的模板，使用目标微生物的特异性引物进行PCR；采用琼脂糖凝胶电泳检测菌株的PCR扩增产物，筛选出扩增DNA片段大小与目标微生物扩增DNA片段相近的菌株，即为潜在目标微生物。
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