[发明专利]一种萌发初期的羊草种子RNA提取方法在审

专利信息
申请号: 201810319326.9 申请日: 2018-03-31
公开(公告)号: CN108277218A 公开(公告)日: 2018-07-13
发明(设计)人: 孔令琪;叶文兴;任卫波;王照兰;武自念 申请(专利权)人: 中国农业科学院草原研究所;文县农牧局
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 010010 内蒙古自治区呼和浩特市*** 国省代码: 内蒙古;15
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摘要: 发明公开了一种萌发初期的羊草种子RNA提取方法,该提取方法选用提取缓冲液A将含有PVPP的羊草种子冻干粉溶解,加入PVP、NP‑40和蛋白酶K,经水饱和酚+氯仿+异戊醇抽提,用Trizol提取方法再次抽提,最终得到高质量、高纯度的羊草种子RNA。本发明较好的去除了淀粉和蛋白质对RNA提取的干扰,使得试管中的溶液分层清晰明显,提取过程方便,DTT、PVPP、PVP和β‑巯基乙醇以及Trizol提取液B中的高浓度Na+有利于去除多糖物质和酚类物质对RNA的干扰,减少抽提的次数,减少了RNA在操作过程中的损失。本发明具有高效率、高质量、低成本和周期短等优点,提取的RNA可以直接用于分子生物学研究。
搜索关键词: 羊草种子 抽提 分子生物学研究 提取缓冲液 操作过程 多糖物质 酚类物质 溶液分层 巯基乙醇 蛋白酶K 饱和酚 低成本 冻干粉 高纯度 高效率 提取液 异戊醇 试管 氯仿 淀粉 去除 蛋白质 溶解 清晰
【主权项】:
1.一种萌发初期的羊草种子RNA提取方法,其特征在于:所述羊草种子RNA提取方法选用提取缓冲液A将含有多聚聚乙烯比咯烷酮PVPP的羊草种子冻干粉溶解,加入聚乙烯吡咯烷酮PVP、乙基苯基聚乙二醇NP‑40和蛋白酶K,经水饱和酚+氯仿+异戊醇抽提,用Trizol提取方法再次抽提,最终得到高质量、高纯度的羊草种子RNA。
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