[发明专利]一种用于饲料型四倍体刺槐的工厂化育苗方法

摘要

本发明公开了一种用于饲料型四倍体刺槐的工厂化育苗方法，包括无菌试管苗的获得、试管苗增殖培养和试管苗的生根炼苗移栽技术。本发明提供了启动培养基、管苗增殖培养基和生根培养基，使试管苗月增殖系数可达到10～12，一个愈伤组织上丛生芽苗数量10～15，最高可达22，生根率达95％以上，在炼苗移栽时通过炼苗营养钵中河沙和混合育苗基质，使炼苗成活率达95％以上，移栽成活率达100％。所以，本发明解决了饲料型四倍体刺槐繁殖效率普遍偏低的问题以及成活率低的问题，且本发明技术操作简单，可使四倍体刺槐快速繁殖，达到迅速推广的目的。

主权项

1.一种用于饲料型四倍体刺槐的工厂化育苗方法，其特征在于，包括：/n四倍体刺槐槐无菌试管苗的获得；试管苗增殖培养；试管苗的生根炼苗移栽；/n具体步骤如下：/n(1)外植体选择、处理/n在4、5月份，选取生长健壮、具有典型性状的优良单株，剪取20～30cm嫩枝，用柔软的毛刷蘸取洗洁精溶液轻轻涮洗枝条表面的灰尘，洗净后，流水冲洗0.5小时，把枝条按嫩梢、中段、下端分成三个枝段，每个枝段至少带1个芽；/n(2)外植体消毒/n在超净工作台上，75％酒精浸泡上述三枝段30s～60s，无菌水冲洗外植体3遍，加入0.1％升汞溶液消毒，用无菌水冲洗4～6次,取出枝段，用灭菌滤纸吸干枝段表面的水分；/n所述升汞消毒时间是嫩梢消毒6min，中段消毒8min，下端消毒10min；/n(3)外植体接种/n将带芽的枝段接入芽启动培养基上，诱导顶芽和腋芽萌发；每瓶接种3个枝段；所述启动培养基是指：MS、琼脂5.0g/L和蔗糖30g/L,pH值6.0；/n(4)初代培养/n将接种好的外植体放入培养室培养，经过10～15d的培养，枝段腋芽或顶芽开始萌动，茎尖明显伸长，基部产生少量愈伤组织，30～40d可长成2～4cm的新梢；/n(5)试管苗增殖培养/n将诱导出的新梢切成含1～2个腋芽的枝段或茎尖转接到试管苗增殖培养基上进行增殖培养，25～30d继代一次，接种；所述增殖培养基是指：MS、6-BA0.5mg/L、IBA 0.25mg/L、KT0.25mg/L、琼脂5.0g/L和蔗糖30g/L,pH值6.0；/n(6)生根培养/n将步骤(5)中增殖培养出的小苗切成单株转接到生根培养基上培养；/n所述生根培养基是指：1/2MS+IBA 0.7mg/L+NAA 0.1mg/L+琼脂5.0g/L+蔗糖20g/L,pH值6.0，其中1/2MS指的是MS全量减半；/n(7)炼苗移栽/n步骤(6)中生根培养的小苗有小根发出，不超过1cm时进行炼苗移栽；移栽的混合育苗基质的成分以体积比计为：园土:锯末：有机肥:腐殖土＝50:20:10:20；/n移栽时将距上口2cm处的混合育苗基质取出，用干净的河沙代替育苗基质装入；/n(8)移入大田；/n5月底之前炼苗，当年移栽入大田，或6月份以后炼苗，来年再移栽。/n