[发明专利]一种利用植物激素GA及小分子物质PAC调节细胞通路的方法

摘要

本发明提供了一种利用植物激素GA及小分子物质PAC调节细胞通路的方法，实现了人细胞内信号通路的调控开关。将拟南芥内GA受体蛋白GID1及GAI构建在人细胞表达载体上，然后一起转入HEK293T细胞，加入GA，诱导两个蛋白相互作用，加入抑制剂PAC后，互作程度会减弱。利用这种方式，将人细胞信号通路中的关键蛋白与这两个受体蛋白融合表达，两个受体蛋白在GA诱导下互作，导致融合的信号通路也受GA的诱导。本发明选择了人Wnt通路上的关键蛋白LRP6。融合表达GA受体以及LRP6以后，LRP6会在GA诱导下聚集，进而促进β‑连环蛋白的产生，打开细胞内的信号通路，加入PAC抑制后，β‑连环蛋白产生量减少，细胞通路关闭。

主权项

1.一种利用植物激素GA及小分子物质PAC调节细胞通路的方法，其特征在于：采用以下引物：GID1‑F：GCGTGGTACCTCTAGAATGGCTGCGAGCGATGAAGT，GID1‑R：GAAGCGGCCGCCCGGGTTAACATTCCGCGTTTACAA；GID1‑F：GCGTGGTACCTCTAGAATGGCTGCGAGCGATGAAGT，GID1‑LRP6C‑R：CCCGAGCCACCGCCGGAACCGCCACCTTAACATTCCGCGTTTACAA；LRP6C‑F：GGCGGTGGCTCGGGAGGTGGCTCAAGGATGTTGTGTCCACGTAT，LRP6C‑R：GAAGCGGCCGCCCGGGTCAGGAGGAGTCTGTACAGG；GAI‑F：GCGTGGTACCTCTAGAATGAAGAGAGATCATCATCA，GAI‑R：GAAGCGGCCGCCCGGGATTGGTGGAGAGTTTCCAAG；GAI‑F：GCGTGGTACCTCTAGAATGAAGAGAGATCATCATCA，GAI‑LRP6C‑R：CCCGAGCCACCGCCGGAACCGCCACCATTGGTGGAGAGTTTCCAAG；LRP6C‑F：GGCGGTGGCTCGGGAGGTGGCTCAAGGATGTTGTGTCCACGTAT，LRP6C‑R：GAAGCGGCCGCCCGGGTCAGGAGGAGTCTGTACAGG。