[发明专利]用于cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法

摘要

本发明公开了用于cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法，其中，接头包括顶部接头和底部接头，分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；引物组包括SEQ ID NO:4‑6所示的序列；试剂盒包括上述接头和引物组；cfDNA建库的方法包括：(1)将cfDNA进行末端修复，并在cfDNA的3’端添加A碱基；(2)将cfDNA末端连接上接头得到连接产物；(3)对连接产物进行第一轮扩增，并对产物进行磁珠纯化；(4)对磁珠纯化后的第一轮扩增产物进行建库扩增，产物磁珠纯化后，得到高通量测序文库。利用该接头和cfDNA建库方法获得的文库，适用于Illumina测序平台，并可以提高文库转化效率。

主权项

1.一种用于cfDNA建库的接头，其特征在于，所述接头为双链接头，包括顶部接头和底部接头，所述顶部接头的序列为：5’‑ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTNNNNNNNNNNNNGCCGCCGCCGCCG*T‑3’，其为SEQ ID NO:1所示；所述底部接头的序列为：5’‑P‑CGGCGGCGGCGGC‑3’，其为SEQ ID NO:2所示；其中顶部接头中12个碱基“NNNNNNNNNNNN”为标签序列。