[发明专利]一种基于稳定同位素标记质谱联用技术检测血浆中羧酸类代谢物的方法在审
申请号: | 201810368036.3 | 申请日: | 2018-04-23 |
公开(公告)号: | CN108931603A | 公开(公告)日: | 2018-12-04 |
发明(设计)人: | 胡清源;何昀潞;侯宏卫;罗彦波;陈欢;陈建 | 申请(专利权)人: | 国家烟草质量监督检验中心 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88;G01N30/86 |
代理公司: | 北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11382 | 代理人: | 侯淑红;孙维傲 |
地址: | 450001 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于稳定同位素标记质谱联用技术检测血浆中羧酸类代谢物的方法,本方法通过对差异标记的血浆样品的信号识别,改善了质谱检测羧酸类代谢物时离子化效率低和灵敏度不足的问题,实现了样品中含羧基化合物的非靶向分析,还可用于稳定的相对定量。 | ||
搜索关键词: | 代谢物 羧酸类 稳定同位素标记 技术检测 质谱联用 血浆 含羧基化合物 离子化效率 差异标记 相对定量 信号识别 血浆样品 质谱检测 非靶向 灵敏度 可用 分析 | ||
【主权项】:
1.一种基于稳定同位素标记质谱联用技术检测血浆中羧酸类代谢物的方法,所述方法包含以下步骤:(1)血浆样品溶液的制备:血浆中加入提取溶液进行提取,涡旋混匀后离心取上层有机相,于氮气下吹干,复溶于乙腈中作为样品溶液备用;(2)样品溶液的同位素标记:取步骤(1)中的样品溶液与催化剂和激活剂充分混匀后,加入“轻”同位素衍生化试剂反应,反应体系置于‑20℃条件下冷冻10min即终止反应,用缓慢氮气流吹干,所得固体样品复溶于乙腈/水(50/50,v/v)中,即得到“轻”同位素标记的衍生化产物;将“轻”同位素衍生化试剂换为“重”同位素衍生化试剂重复上述操作,得到“重”同位素标记的衍生化产物;将“轻”“重”衍生化产物等比例混合均匀,即得待测液;(3)羧酸类代谢物的非靶向代谢组学分析:取步骤(2)中的待测液进行液相色谱‑双中性丢失扫描‑质谱分析,根据“轻”“重”衍生化产物的质荷比差异,扫描特定的中性丢失片段,结合保留时间与质谱信号强度进行筛选,找出潜在的羧酸类代谢物。
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