[发明专利]一种壳聚糖或壳聚糖盐中蛋白质含量的测定方法有效
申请号: | 201810369311.3 | 申请日: | 2018-04-23 |
公开(公告)号: | CN108956488B | 公开(公告)日: | 2020-11-10 |
发明(设计)人: | 刘斌;施燕平;秦洋;张晓漫 | 申请(专利权)人: | 山东省医疗器械产品质量检验中心 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N1/38 |
代理公司: | 济南竹森知识产权代理事务所(普通合伙) 37270 | 代理人: | 朱家富 |
地址: | 250000 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种壳聚糖或壳聚糖盐中蛋白质含量的测定方法,包括如下步骤:(1)配制库马斯亮蓝G‑250试液;(2)称取壳聚糖或壳聚糖盐样品,制得浓度为5mg/ml的样品溶液;(3)配制不同浓度的蛋白质标准溶液,加入库马斯亮蓝G‑250试液,绘制吸光度‑‑‑浓度曲线;(4)向样品溶液中加入库马斯亮蓝G‑250试液,测定样品溶液在595nm处的吸光度,计算样品中蛋白质含量。本发明通过在低于2%的盐酸浓度的条件下,采用超声处理15min并在100℃水浴处理待检测的壳聚糖/壳聚糖盐体系,然后通过特定浓度的库马斯亮蓝G‑250进行染色,经595nm处的吸光度值进行检测,可以显著提高蛋白质检测数值的准确度。 | ||
搜索关键词: | 一种 聚糖 蛋白质 含量 测定 方法 | ||
【主权项】:
1.一种壳聚糖或壳聚糖盐中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将库马斯亮蓝溶解于体积百分比浓度为95%的乙醇溶液中,加入浓盐酸,库马斯亮蓝G‑250与浓盐酸的质量体积比为2:1,单位为mg/ml,蒸馏水稀释至库马斯亮蓝浓度为100mg/L,制得库马斯亮蓝G‑250试液;(2)称取103~107℃干燥至恒重的壳聚糖或壳聚糖盐样品,溶解于质量百分比浓度为1%的醋酸溶液中,混合均匀,超声波处理,然后沸水浴中处理25~35min,制得浓度为5mg/ml的样品溶液;(3)配制不同浓度的蛋白质标准溶液,加入步骤(1)制得库马斯亮蓝G‑250试液,测定595nm处各标准溶液的吸光度,绘制吸光度‑‑‑浓度曲线;(4)向步骤(2)制得的样品溶液中加入步骤(1)制得库马斯亮蓝G‑250试液,测定样品溶液在595nm处的吸光度,计算样品中蛋白质含量。
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