[发明专利]一种标记β-D葡聚糖的结合蛋白及其纯化合成方法在审
| 申请号： | 201810377374.3 | 申请日： | 2018-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN108531499A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 咸涛 | 申请（专利权）人： | 江苏诺鬲生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K16/14;G01N33/569 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 225300 江苏省泰州市中国医*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种标记β‑D葡聚糖的结合蛋白及其纯化合成方法，其中包括载体系统的转化及对表达菌株的优化诱导，少量试验后对高表达菌株筛选培养，进行大量的蛋白纯化合成洗脱。本发明产品通过构建好的表达载体转化到表达菌株内，筛选菌落并进行PCR测序验证，得到阳性菌株，进行少量预实验后，同时进行SDS‑PAGE,确认目的蛋白的表达，筛选出高表达菌株，随后对该高表达菌株进行大量培养，再进一步进行大量蛋白纯化，该结合蛋白能够有效与真菌细胞壁成份β‑D葡聚糖进行免疫亲和，准确标记真菌表面β‑D葡聚糖抗原。 | ||
| 搜索关键词： | 葡聚糖 结合蛋白 高表达 表达菌株 蛋白纯化 合成 菌株 筛选 真菌细胞壁 表达载体 菌株筛选 免疫亲和 目的蛋白 阳性菌株 载体系统 准确标记 菌落 抗原 真菌 构建 洗脱 转化 诱导 验证 试验 优化 | ||
【主权项】：
1.一种能够标记真菌细胞壁成份β‑D葡聚糖的结合蛋白，其特征在于其中包括载体系统转化及对表达菌株的优化诱导表达及菌株筛选后的大量纯化，所述载体序列为PTXB1 大肠杆菌表达载体，所述表达菌株为BL21(DE3)大肠杆菌。
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