[发明专利]CRISPR-Cas9靶向敲除人肠癌细胞PPP1R1C基因及其特异性的sgRNA在审
| 申请号： | 201810396783.8 | 申请日： | 2018-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN108642053A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 杨佳丽;杨兴林;潘讴东;夏清梅;刘梅锐 | 申请（专利权）人： | 和元生物技术（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867;C12N5/10;C12N15/90 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201321 上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了CRISPR/Cas9靶向敲除人肠癌细胞PPP1R1C基因及其特异性sgRNA序列。首先是获得特异性靶向PPP1R1C基因功能区的sgRNA，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其次是构建PPP1R1C基因的sgRNA到慢病毒载体系统，该系统含有Cas9蛋白；最后将含有该sgRNA的CRISPR/Cas9慢病毒感染人肠癌HT‑29细胞，获得PPP1R1C蛋白表达水平显著降低的细胞株。本发明具有操作步骤简单、sgRNA靶向性好、对PPP1R1C基因切割效率高；且所构建的CRISPR/Cas9慢病毒系统具有敲除效率高并能特异性敲除PPP1R1C基因，得到敲除PPP1R1C基因的人肠癌细胞，从而为进一步研究肠癌细胞中PPP1R1C的作用机制提供强有力的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 敲除 肠癌细胞 基因 靶向 构建 慢病毒载体系统 蛋白表达水平 慢病毒感染 特异性靶向 基因功能 碱基序列 切割效率 作用机制 肠癌 靶向性 慢病毒 细胞株 蛋白 细胞 研究 | ||
【主权项】：
1.一种CRISPR/Cas9靶向敲除人肠癌细胞PPP1R1C基因及其特异性的sgRNA，其特征在于，首先设计获得特异性靶向PPP1R1C基因功能区的sgRNA；其次构建PPP1R1C基因的sgRNA到慢病毒载体系统；然后将此慢病毒载体系统感染人肠癌HT‑29细胞，得到的PPP1R1C基因敲除细胞株。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于和元生物技术（上海）股份有限公司，未经和元生物技术（上海）股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810396783.8/，转载请声明来源钻瓜专利网。
